[发明专利]一种红腺忍冬叶绿原酸的超声提取方法

说明书

技术领域

本发明属于红腺忍冬叶绿原酸提取领域，尤其涉及一种红腺忍冬叶绿原酸的超声提取方法。

背景技术

红腺忍冬花[1，2]是忍冬科植物红腺忍冬Lonicera hypoglauca Miq.的干燥花蕾或带初开的花，列在2005年版中国药典“山银花”项下，红腺忍冬资源丰富，主产于河南、山东、云南及广西等地，是山银花药材商品的主要来源之一。红腺忍冬为临床常用中药，其味甘、性寒，用于痈肿疗疮、喉痹、丹毒、热血毒痢、风热感冒、瘟病发热等症，属清热解毒之要药，山银花对多种致病菌均有抑制作用，是一种广谱抗菌中药，有“中药之中的青霉素”之美称。化学和药理研究证实其主要化学成分有挥发油类、有机酸类、黄酮类和苷类，绿原酸是其主要有效成分，药理作用主要有抗菌、抗病毒、解热和抗氧化，其抗菌作用的主要活性成分为绿原酸，但品种与产地不同而不同，因此金银花山及山银花中绿原酸含量的高低，是其质量优劣的重要标志。

长期以来提取绿原酸以金银花为工业原料，但价格昂贵，对同属其它植物开发利用不够，尤其是对红腺忍冬植物叶的重视和研究程度不够，红腺忍冬各部位中都有一定的绿原酸，但含量高低不同，依次为花＞叶＞茎＞根，且叶中的绿原酸含量较高，是花的69.63％，大大超过了根茎，而忍冬茎，叶的药源远比红腺忍冬丰富，采集容易，价格便宜，应该充分利用。因此研究红腺忍冬叶片绿原酸的提取，为充分利用红腺忍冬资源提供一定的理论和应用基础。

发明内容

本发明实施例的目的在于提供一种红腺忍冬叶绿原酸的超声提取方法，旨在解决长期以来提取绿原酸以金银花为工业原料，但价格昂贵，对同属其它植物开发利用不够，尤其是对红腺忍冬植物叶的重视和研究程度不够，红腺忍冬各部位中都有一定的绿原酸，但含量高低不同，依次为花＞叶＞茎＞根，且叶中的绿原酸含量较高，是花的69.63％，大大超过了根茎，而忍冬茎，叶的药源远比红腺忍冬丰富，采集容易，价格便宜，应该充分利用的问题。

本发明实施例是这样实现的，一种红腺忍冬叶绿原酸的超声提取方法，该超声提取方法包括以下步骤：

步骤1，进行绿原酸含量测定，主要包括：

(1)最大吸收波长的确定

分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液适量，置10mL量瓶中，再加水至刻度，摇匀，放置15min，以相应试剂为空白，在分光光度计上于200-400nm扫描；对照品溶液与供试品溶液在328nm处均有最大吸收，故将328nm作为测定波长；

(2)对照品溶液的制备

精密称取对照品10mg，加适量70％乙醇，置水浴上微热使溶解，放冷后定容至50ml，摇匀，即得，每1ml含红腺忍冬叶0.2mg；

(3)标准曲线的绘制

精密量取对照品溶液2、4、6、8、10、12mL，分别置于50mL量瓶中，加水适量，摇匀.再加水至刻度，摇匀，放置15min，以相应试剂为空白.在328nm波长处测定吸光度。以绿原酸标品的浓度为横坐标，以在328nm下测得不同浓度的绿原酸标准品的吸光值为纵坐标，做标准曲线，得回归方程；

步骤2，进行红腺忍冬叶中绿原酸超声提取的单因素试验，主要包括：

药材与一定量的溶剂于烧杯中，放入超声波清洗器一定时间，过滤，再将溶液放入烧瓶，用旋转蒸发仪进行浓缩提取，干燥得到提取粗品，在紫外分光光度计下测定吸光值，并计算绿原酸的提取率；

分别对影响超声提取的每一因素，设计5个水平进行试验，通过比较提取率确定对提取率影响较大的4个因数进行正交试验；

(1)溶剂乙醇浓度

按乙醇浓度40％，50％，60％，70％，80％，其它提取条件为提取1次、提取时间10分钟、溶剂体积为药材重量8倍和提取温度60℃的情况下进行超声提取。比较提取率，得出最佳溶剂乙醇浓度；

(2)溶剂体积(药材重量倍数)

按溶剂体积为6倍、8倍、10倍、12倍、14倍，其它提取条件为提取1次、提取时间10分钟、最佳乙醇浓度和提取温度60℃情况下，进行超声提取，比较提取率，得出最佳溶剂体积；

(3)提取温度

按提取温度40℃、50℃、60℃、70℃、80℃，其它提取条件：提取1次、提取时间10分钟、最佳乙醇浓度、最佳溶剂体积情况下，进行超声提取，比较提取率，得出最佳提取温度；

(4)提取时间(分钟)