[发明专利]一种来源于枝孢霉的脂肪酶、其编码基因序列及其用途有效
申请号: | 201210532087.8 | 申请日: | 2012-12-11 |
公开(公告)号: | CN103865941B | 公开(公告)日: | 2018-02-16 |
发明(设计)人: | 徐正军;陈苗苗;周美凤;许骏 | 申请(专利权)人: | 丰益(上海)生物技术研发中心有限公司 |
主分类号: | C12N15/55 | 分类号: | C12N15/55;C12N9/20;C12N15/63;C12N1/21;C12N1/15;C12N1/19;C12N5/10;C12R1/645 |
代理公司: | 上海智信专利代理有限公司31002 | 代理人: | 王洁 |
地址: | 200137 上海市浦*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 来源于 枝孢霉 脂肪酶 编码 基因 序列 及其 用途 | ||
1.一种编码来源于枝孢霉的脂肪酶的基因序列,所述序列编码:
(i)具有与SEQ ID NO:2所示氨基酸序列98%以上同源性的蛋白质;或
(ii)具有与SEQ ID NO:2的第22-464位所示的氨基酸序列98%以上同源性的蛋白质。
2.如权利要求1所述的基因序列,其特征在于,所述基因序列选自:
(i')具有与SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列98%以上同源性的序列;或
(ii')具有与SEQ ID NO:1的第64-1392位所示的核苷酸序列98%以上同源性的序列。
3.如权利要求1或2所述的基因序列,其特征在于,所述枝孢霉为枝孢霉菌株CGMCC No.4962。
4.一种来源于枝孢霉的脂肪酶,其特征在于,所述脂肪酶的氨基酸序列选自:
(a)具有与SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列98%以上同源性;或
(b)具有与SEQ ID NO:2中第22-464位所示的氨基酸序列98%以上同源性。
5.一种包含权利要求1~3中任一项所述的基因序列或权利要求4中所述的脂肪酶的编码基因序列的载体。
6.一种宿主细胞,其特征在于,所述细胞包含权利要求1~3中任一项所述的基因序列、权利要求4中的脂肪酶的编码基因序列或权利要求5中所述的载体。
7.一种生产脂肪酶的方法,其特征在于,所述方法包括:在适合权利要求6所述的宿主细胞产生如权利要求4所述的脂肪酶的条件下,培养所述宿主细胞;以及,分离由所述宿主细胞产生的所述脂肪酶。
8.一种进行脂肪酶催化反应的方法,其特征在于,所述方法包括:
(A)使权利要求4中所述的脂肪酶、权利要求6中所述的宿主细胞或用权利要求7所述方法生产的脂肪酶与反应体系接触;以及
(B)在适宜所述脂肪酶进行催化的条件下,进行催化反应。
9.如权利要求8所述的方法,其特征在于,所述催化反应在有机溶剂环境中进行。
10.如权利要求9所述的方法,其特征在于,所述有机溶剂浓度为大于0%小于等于50%。
11.如权利要求9所述的方法,其特征在于,所述有机溶剂浓度为5~45%。
12.如权利要求9所述的方法,其特征在于,所述有机溶剂浓度为10~40%。
13.如权利要求9所述的方法,其特征在于,所述有机溶剂浓度为15~35%。
14.如权利要求9-13中任一项所述的方法,其特征在于,所述有机溶剂选自甲醇、乙醇、丙酮、DMSO、苯、甲苯、正己烷和异辛烷中的一种或多种。
15.一种增强脂肪酶催化活性的方法,其特征在于,所述方法包括:采用权利要求4所述的脂肪酶或权利要求7生产的脂肪酶进行催化反应时,添加Ca2+、Mg2+、K+、Na+、NH4+、Ni2+、Triton X-100或AEO-9中的一种或多种。
16.如权利要求15所述的方法,其特征在于,所述的Ca2+、Mg2+、K+、Na+、NH4+或Ni2+的添加浓度为大于0mM小于等于50mM,所述的Triton X-100或AEO-9的浓度为大于0%小于等于2%。
17.一种抑制脂肪酶催化活性的方法,其特征在于,所述方法包括:采用权利要求4所述的脂肪酶或权利要求7生产的脂肪酶进行催化反应时,添加Zn2+、Co2+、SDS或CTAB中的一种或多种。
18.如权利要求17所述的方法,其特征在于,所述的Zn2+或Co2+的添加浓度为大于0mM小于等于50mM,所述的SDS或CTAB的浓度为大于0%小于等于2%。
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