[发明专利]用于显微检查生物样本的样本载体和方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种根据权利要求1前序部分的用于显微检查生物样本的样本载体，以及涉及一种用于在生物样本中识别荧光标记的物体的方法。

背景技术

将微粒(如细胞、细菌等)从生物液体(如血液或尿液)中分离如今越来越多地通过微过滤(Mikrofiltration)进行。在此利用这一点，即，所需的微粒，例如在血液中循环的肿瘤细胞明显大于大多数其余存在于生物液体中的微粒或细胞。如此通过过滤而分离出的微粒接下来可利用通常的细胞学或免疫化学的方法着色且紧接着可在显微镜下观察、识别和记录。

大多使用薄的高分子薄膜以用于微过滤，该高分子薄膜具有所期望数量级的孔隙率。在过滤之后将微过滤器转移到载玻片上，以便可在显微镜中观察该微过滤器。

该步骤费事且此外还带有这样的风险，即，转移有缺陷或损坏膜。

在分析通过微过滤获得的微粒时的另一问题在于较大的过滤面积(须在显微镜中在该过滤面积上找到微粒)。在许多应用中，所需的微粒的数量是这样少，使得必须充分利用整个过滤面积，以便得到可用且可靠的结果。由于所需的微粒相对于过滤面积来说较小，须制出过滤面积的数量较多的明显放大的显微图像，以便一方面涵盖整个过滤面积且另一方面不遗漏一个所需的微粒。这一点也非常费时且费工。

现有技术DE 10 2010 001 322 A1中公开了一种微过滤器，该微过滤器直接与用于显微镜的载玻片一体化。由此可取消将过滤器转移到载玻片上这一复杂步骤。然而即使在这类过滤装置中也总是存在这样的问题，即，利用显微照片涵盖整个过滤面积是极其耗时和复杂的。

因此本发明的目的在于，提供一种开头所提及的形式的样本载体以及方法，利用该样本载体和方法，能特别迅速地探测到在生物样本中的已标记的微粒。

发明内容

该目的通过带有权利要求1的技术特征的样本载体以及通过带有权利要求10的技术特征的方法实现。

这类用于在显微镜下检查生物样本的样本载体包括带有至少一个凹口的基体，在该凹口中设置有滤膜，该滤膜与样本载体的表面基本对齐地端接(abschlieβen)。根据本发明，在此这样设置，即，样本载体构造成圆形。样本载体的圆形造型使得以下成为可能，即对过滤表面进行特别迅速的显微扫描。与由现有技术中已知的、带有一体化的微过滤器的载玻片不同的是，这类样本载体则可旋转地容纳在荧光显微镜等之下，从而与容纳在传统的十字工作台上的载物台()相比，可明显更迅速地进行整个过滤表面的扫描。为此，载玻片只须旋转移动，其中，样本载体和显微镜之间沿径向方向的相对运动就足够在显微镜下获取样本载体的整个面积。此外这一点在机械上也特别简单。

样本载体优选具有在中心的圆形通孔。相应的驱动轴的心轴(Dorn)可接合到该通孔中，从而使得用于分析的样本载体旋转地移动。

该通孔优选具有15mm的直径和1.2mm的边缘高度。这一点与光盘标准或DVD标准或蓝光标准相符，从而用于操作这类样本载体的工具可以特别简单且价格上有利的方式由本来产量就很大且因此特别便宜的构件制造。当然，另外的尺寸或与另外的标准相匹配也是可以的。

在本发明另一优选的实施形式中，至少一个凹口以及相关联的滤膜为圆形的。这使得以特别简单的方式将待过滤的液体均匀施覆在滤膜上成为可能，这例如可简单地通过移液到圆形膜的中心进行。

为此，至少一个凹口以及相关联的滤膜也可备选地形成与样本载体同心的环。这在另一方面有助于扫描在旋转的样本载体上的膜表面，因为在样本载体单独转动期间可连续且不间断地检测膜表面。

至少一个凹口优选具有用于滤液的流出通道。这使得在无残留物的情况下观察作为渗余液保留在过滤表面上的细胞或其余微粒成为可能。

在本发明另一优选的实施形式中，在至少一个凹口中设置有用于支撑滤膜的支撑体，这使得使用特别薄且脆弱的滤膜成为可能，该滤膜由于有支撑体而能无困难地经受住在涂覆样本、过滤和旋转扫描期间的载荷。

滤膜优选具有最大20μm，优选5μm至20μm的孔径。这类过滤器尤其适用于将从血液中冲洗出的肿瘤细胞分离出，因为大部分白细胞、红细胞和另外的细胞状的血液成分可无困难地穿过这类过滤器，而明显较大的肿瘤细胞则保留在过滤表面上。

为了有助于显微检查，基体优选由透明材料，尤其是玻璃、聚碳酸酯等构造成。