[发明专利]抗单核细胞增生性李斯特菌溶血素单抗与应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种抗单核细胞增生性李斯特菌溶血素单抗，还涉及该单抗的制备方法及其应用。 

背景技术

单核细胞增生性李斯特菌(Listeria monocytogenes，LM)为革兰阳性兼性厌氧菌，是李斯特菌属中致病性最强的一种细菌，也是重要的食源性病原菌，能引起人兽共患李斯特菌病。LM对多种畜禽均有较高的致死率，人类感染后的主要表现为脑膜炎、流产及中枢神经系统感染。LM能使婴幼儿、怀孕妇女和免疫耐受病人的感染死亡率可高达20％～30％。近年来，LM在美国、加拿大、德国、瑞士、意大利等国多次暴发流行，食源性病人也日益增多。由于LM引起的食物中毒危害日益严重，国内外给予极大关注。对该病建立快速、灵敏、准确的检测方法是有效防治本病、诊断病原菌和保证食品卫生安全的重要手段，也是非常必要的。 

李斯特菌溶血素(listeriolysin O，简称LLO)是LM特有的毒力因子，它通过溶解细胞吞噬体膜而使LM逃离吞噬体。根据GenBank在对不同株LM溶血素基因的同源性分析可知，至少有97％核苷酸和99％的氨基酸是一致的。在其他类型的李斯特菌中没有该毒素，这也是建立基于LLO单抗的ELISA检测方法的基础。 

发明内容

为了提供一种有效的LM检测方法，本发明公开了一种抗单核细胞增生性李斯特菌溶血素单抗。该单抗的轻、重链可变区基因分别如序列表中序列1、2所 示，轻、重链可变区和CDR区氨基酸序列分别如序列表中序列3、4所示。 

单核李斯特菌溶血素单抗3C11轻链可变区基因测序结果320bp，见序列表中序列1，如下所示： 

SEQ ID NO.1： 

GTTCTCACCCAATCTCCAGCAATCATGTCTGCATCTCCAGGGGAAAAGGTCACCATGACCTGCAGGGC 

CAGCTCAAGTGTGAGTTCCACTTTCTTGCACTGGTTCCAGCAGAAGTCAGGTGCCTCCCCCAAACTCT 

GGATTTATAGCACATCCAACTTGGCTTCTGGAGTCCCTGCTCGCTTCAGTGGCAGTGGGTCTGGGACC 

TCTTACTCTCTCACAATCAGCAGTGTGGAGGCTGAAGATGCTGCCACTTATTACTGCCAGCAGTACAG 

CGGTTATCCATTCACGTTCGGCTCGGGGACAAAGTTGGAAATAAAACG 

单核李斯特菌溶血素单抗3C11重链可变区基因测序结果342bp，见序列表中序列2，如下所示： 

SEQ ID NO.2： 

GCTGCAGGAGTCTGGAGGAGGCTTGGTGCAACCTGGAGGATCCATGAAACTCTCCTGTGTAGCCTCTG 

GATTAACTTTCAGTAGCTACTGGATGTCTTGGGTCCGCCAGTCTCCAGAGAAGGGGCTTCAGTGGGTT 

GCTGAAATTAGATTGAAATCTGATAATTATGCAACACATTATGCGGAGTCTGTGAAAGGGAAGTTTAC 

CATCTCAAGAGATGATTCCAGAGGTCGTCTCTACCTGCAAATGAACAACTTAAGAGCTGAAGACACTG 

GAATTTATTACTGTACGACATTACTACGGCTACCTTACTGGGGCCAAGGGACTCTGGTCACTGTCTCT 

GC 

序列3： 

SEQ ID NO.3根据Kabat数据库确定轻链可变区序列和CDR区3C11 L V 

V L T Q S P A I M S A S P G E K V T M T C R A S S S V S S T F L H W F 

Q Q K S G A S P K L WIY S T S N L A S G V P A R F S G S G S G T S Y 

S L T I S S V E A E D A A T Y Y C Q Q Y S G Y P F T F G S G T K L E I 

K R 

序列4. 

SEQ ID NO.4根据Kabat数据库确定重链可变区序列和CDR区3C11 H V