[发明专利]MUC1自身抗体识别的抗原多肽

说明书

技术领域

本发明涉及生物医学领域。具体地，本发明涉及MUC1自身抗体识别的抗原多肽及其用途。更具体地，本发明涉及一种MUC1自身抗体识别的抗原多肽、该多肽在制备检测肿瘤血清MUC1抗体的用途、一种用于检测样品中MUC1抗体的试剂盒。

背景技术

肺癌生物学特性十分复杂、恶性程度高且隐匿性强，高死亡率的关键性因素在于缺乏有效的早期诊断。众所周知，肺癌的预后与诊断时该病的分期密切相关。肺癌患者在不同的肿瘤分期，其5年存活率如下：I期5年存活率60-70%，II期5年存活率40-50%，IIIB期和IV期为5-20%。大部分肺癌在无痛期（大约8年）是没有临床症状，同时，临床上仍没有有效的筛查方法能发现早期肺癌，临床常用几种肺癌标志物，如神经元特异性烯醇化酶（NSE）、胃泌素释放肽前体（pro-GRP）、细胞角蛋白19（CYFRA21-1）、p53抗体和癌胚抗原(CEA)等，也没有一个肿瘤标志物对早期肺癌的发现有足够的敏感性、特异性和可重复性，因此制约了我们对早期肺癌进行有效筛选。因此，我们认为迫切需要寻找有效肿瘤相关标志物用于肺癌早期诊断。

肿瘤自身抗体是在肿瘤的恶变过程中，因新的蛋白质产生，同时某些蛋白质被过度表达，从而激发机体的免疫应答，产生多种针对自身抗原和肿瘤抗原的抗体，虽然其产生机制及作用并不清楚，但这些自身抗体的存在表明体液免疫识别肿瘤抗原中起着一定的作用。相较于血清中肿瘤抗原型标志物，血清中肿瘤抗原相应自身抗体具有丰度高，出现早，易检测等优势，可能成为更为可靠的血清肿瘤标志物。

MUC1是一种膜结合型黏蛋白，在许多组织的上皮细胞表面都有丰富表达，对正常的上皮起润滑和保护作用；同时，MUC1可和多种分子相互作用，从而影响细胞的生理生化功能。MUC1的异常表达也是多种癌症的一个显著特性，由于MUC1在多种肿瘤中异常表达，主要包括（1）表达量增加，可达正常时的100倍以上；（2）细胞表面分布的改变，极性分布丧失，整个细胞表面均表达；（3）结构改变，主要由于糖基化不全，出现异常糖基化和异常肽表位，使其成为一种潜在的肿瘤相关标志物。针对它在肿瘤细胞中异常表达的特点，推测其自身抗体表达水平的检测可能更能反映这种变化。然而目前针对MUC1自身抗体的检测，大多使用MUC1全长蛋白，而全长纯蛋白的制备和纯化过程较为复杂，难度较大，大大增加了检测成本；且全长蛋白检测自身抗体时表位曝露不佳，使检测的敏感性和特异性均不理想，因此，寻找更为理想的抗原表位多肽代替全长蛋白无疑成为了一个有效的解决途径。

发明内容

本发明旨在解决现有MUC1自身抗体检测试剂盒中MUC1纯蛋白表达、纯化难度高，试剂盒成本高、检测敏感性低的缺陷，而提供一种有用的商业选择。

本发明的另一目的在于提供上述MUC1自身抗体识别的抗原多肽在制备肿瘤检测试剂盒中的应用。

本发明的另一目的在于提供上述MUC1自身抗体识别的抗原多肽检测肿瘤MUC1自身抗体试剂盒。

为此，本发明提出了如何获得有效的MUC1自身抗体识别的抗原多肽方法，并进一步提供了能够有效地检测样品中MUC1自身抗体的手段。

由此，本发明提出了一种MUC1自身抗体识别的抗原多肽。根据本发明的实施例，其多肽活性片段为下列至少之一：

1)SEQ ID No:1所示序列：SFFFLSFHISNLQFNSSLED；

2)SEQ ID No:2所示序列：NLQFNSSLEDPSTDYYQELQ；

3)SEQ ID No:3所示序列：TAPPVHNVTSASGSASGSAS；

4)SEQ ID No:4所示序列：PFSIPSHHSDTPTTLASHST；

5)SEQ ID No:5所示序列：TPTTLASHSTKTDASSTHHS；

6）SEQ ID No:1-5所示氨基酸序列经氨基酸残基的取代、缺失或添加而形成的氨基酸衍生序列。

根据本发明的实施例，优选地，本发明的MUC1自身抗体识别的抗原多肽具有如SFFFLSFHISNLQFNSSLED（SEQ ID NO:1）所示的氨基酸序列。由此，可以进一步提高利用多肽检测肺癌或疑似肺癌患者的血液样品中的MUC1自身抗体的效率。另外，本发明还提出了前面所述的MUC1自身抗体识别的抗原多肽在制备检测肿瘤血清MUC1抗体试剂盒中的用途。尤其是，该试剂盒可以用于检测的肿瘤为肺癌。