[发明专利]miR-125b在红细胞成熟化中的用途

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域，更具体的，本发明涉及miR-125b在红细胞成熟化中的用途。

背景技术

战伤救治和常规治疗中，输血都是及其关键的一个环节，我国血液供应长期处于供不应求的状况，近年来，我国多个城市甚至出现“血荒”的说法。要解决血液来源匮乏的问题，开发新的血源已经成为当前医疗中的迫切需要，其中干细胞研究为体外制备红细胞提供了新希望，包括胚胎干细胞、诱导多能干细胞（iPSC）及脐带、骨髓、外周血来源的造血干祖细胞都可能作为种子细胞，通过大量诱导扩增生成可用于移植的红细胞。

然而，目前关于成熟红细胞的制备仍有待改进。

发明内容

本发明旨在至少在一定程度上解决上述技术问题之一或至少提供一种有用的商业选择。为此，本发明的一个目的在于提出一种具有能够有效地制备成熟红细胞的手段。

本发明是基于发明人的下列发现而完成的：通过在红细胞前体细胞中引入miR-125b，可以提高红细胞脱核效率。

在本发明的第一方面，本发明提出了一种构建体。根据本发明的实施例，该构建体包括编码miR-125b的核酸分子，所述miR-125b具有SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列。由此，利用该构建体，可以有效地将表达miR-125b的核酸分子引入到红细胞前体细胞中，并进一步可以在该细胞中表达miR-125b，从而可以促进该红细胞前体细胞转化为成熟的红细胞。

根据本发明的实施例，编码miR-125b的核酸分子具有选自SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：3的至少一种所示的核苷酸序列。由此，可以进一步提高表达miR-125b的效率，从而进一步提高使得红细胞前体细胞转化为成熟的红细胞的效率。

在本发明的第二方面，本发明提出了一种制备成熟红细胞的方法。根据本发明的实施例，该方法包括：使红细胞前体细胞表达miR-125b，所述miR-125b具有SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列；以及培养表达miR-125b的红细胞前体细胞，以便获得成熟红细胞，其中，该红细胞前体细胞为选自原成红细胞、嗜碱性成红细胞、多染性成红细胞、正染性成红细胞和网织红细胞的至少一种。由此，通过在红细胞前体细胞中表达miR-125b，可以使得红细胞前体细胞转化为成熟红细胞，从而获得成熟红细胞，实现红细胞的体外成熟化。

根据本发明的实施例，该制备成熟红细胞的方法，还可以进一步包括下列附加技术特征：

根据本发明的实施例，使红细胞前体细胞表达miR-125b进一步包括利用前面所述的构建体，将编码miR-125b的核酸分子引入到红细胞前体细胞中。由此，可以进一步提高在红细胞前体细胞中表达miR-125b的效率，从而进一步提高制备成熟红细胞的效率。

根据本发明的实施例，所述红细胞前体细胞为成红细胞。由此，可以进一步提高制备成熟红细胞的效率。

根据本发明的实施例，利用添加100ng/ml的SCF、40ng/ml的IGF、5U/ml的EPO、2mM的L-谷氨酰胺、1μM的地塞米松、40ng/ml的类脂和100μg/m的转铁蛋白的Stem span培养基，培养表达miR-125b的红细胞前体细胞。由此，可以进一步提高将红细胞前体细胞转化为成熟红细胞的效率，进而进一步提高制备成熟红细胞的效率。

在本发明的第三方面，本发明还提出了前面所述的构建体、或者miR-125b在制备成熟红细胞中的用途。

在本发明的第四方面，本发明还提出了一种用于制备成熟红细胞的试剂盒。根据本发明的实施例，该试剂盒包括：适于使红细胞前体细胞表达miR-125b的试剂。由此，利用该试剂盒，能够有效地通过红细胞前体细胞表达miR-125b，可以从红细胞前体细胞制备成熟红细胞。

根据本发明的实施例，该试剂盒还可以具有下列附加技术特征：

在本发明的一个实施例中，所述适于使红细胞前体细胞表达miR-125b的试剂为前面所述的构建体。由此，可以进一步提高利用该试剂盒使得红细胞前体细胞表达miR-125b的效率，进而可以进一步提高从红细胞前体细胞制备成熟红细胞的效率。