[发明专利]结核杆菌Acr蛋白的抗体及其编码基因与应用

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种结核杆菌Acr蛋白的抗体及其编码基因与应用。

背景技术

结核病一直是人们关注的一个全球性健康问题,潜伏感染和耐药性是结核病治疗的两大难题,开发新型全人源抗体药物能很好的解决目前遇到的两大难题，具有重大的意义。

潜伏感染和耐药性是结核病治疗的两大难题：MTB潜伏感染（latenttuberculosisinfection，LTBI）是一种亚临床状态，此时细菌呈休眠状态。普通人群中约有1/3的人感染结核杆菌，其中约10%的感染者可能发生TB，大多数感染者以潜伏感染形式存在。这种潜伏感染状态潜伏时间长达数十年，而且具有随时复发的可能性，并有了可能导致TB爆发。由于潜伏感染人群大，范围广，不易诊断，是目前导致TB爆发的一个重要因素。因而MTB潜伏感染的预防和治疗成为TB的控制与根除的关键环节。

结核杆菌晶体蛋白（Alpha Crystalin，Acr）是结核杆菌在休眠期和缺氧状态下产生的主要蛋白，为结核杆菌在巨噬细胞内持续存在所必需。Acr蛋白上的甲硫酰胺残基能发生可逆的磺化氧化和去磺化氧化作用，借此清除存在于巨噬细胞中的活性氧和活性氮，从而保护MTB的细胞膜和其他成分不受损伤，最终得以在宿主体内存活。当MTB被巨噬细胞吞噬后，为了能在巨噬细胞内生存和生长，MTB许多蛋白的表达都上调，其中Acr的表达活性就增至原来的80倍。有研究结果表明，Acr基因的缺失使MTB在小鼠和巨噬细胞中生长加快，菌落计数发现突变株的细菌数增至野生型的10倍，说明Acr与MTB进入休眠状态密切相关。体外实验也表明，Acr不但能显著减慢小鼠巨噬细胞内结核杆菌的生长速度，而且在结核病患者及潜伏感染者体内存在针对Acr的特异性T细胞和B细胞免疫应答。大量实验数据表明，Acr蛋白是结核分枝杆菌潜伏感染期机体免疫反应的重要靶抗原，对MTB进入休眠状态及MTB休眠菌在体内的存活起着重要的作用。

人类的结核病病例大部分是复发性病例。因此，新型结核病疫苗含有的抗原应是MTB在宿主体内长期存在时(休眠期或潜伏期)大量聚集的靶分子，例如Acr蛋白，理论上这种抗原诱导的免疫反应能够抑制潜伏状态的MTB。如果将该抗原作为疫苗的靶抗原应用，可能会有效防治潜伏性感染结核病的发生。

目前应用的抗结核药物主要是1945～1966年通过传统随机筛检得到的，近些年来新增了一些新型利福平类药物(利福布汀、利福喷汀、KRM-1648等)和新型喹诺酮类药物(左旋氧氟沙星、氧氟沙星、司帕沙星、moxi-floxacin等),这些药物仅能针对活动期肺结核，而对于潜伏性感染者（约占全部感染者的90%）不起作用，而且随着耐药菌株和多重耐药菌株的日益严重，亟需研制出新方法来预防和控制该种疾病，针对休眠期蛋白Acr筛选出的全人源的抗体药物可能解决目前形势下的两大难题（即潜伏感染和耐药性）。

发明内容

本发明的目的是提供结核杆菌Acr蛋白的抗体及其编码基因。

本发明提供的多肽，为结核杆菌Acr蛋白抗体，为如下1）-15）中的任意一种：

1）由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的多肽；2）由序列表中序列4所示的氨基酸序列组成的多肽；3）由序列表中序列6所示的氨基酸序列组成的多肽；4）由序列表中序列8所示的氨基酸序列组成的多肽；5）由序列表中序列10所示的氨基酸序列组成的多肽；6）由序列表中序列12所示的氨基酸序列组成的多肽；7）由序列表中序列14所示的氨基酸序列组成的多肽；8）由序列表中序列16所示的氨基酸序列组成的多肽；9）由序列表中序列18所示的氨基酸序列组成的多肽；10）由序列表中序列20所示的氨基酸序列组成的多肽；11）由序列表中序列22所示的氨基酸序列组成的多肽；12）由序列表中序列24所示的氨基酸序列组成的多肽；13）由序列表中序列26所示的氨基酸序列组成的多肽；14）由序列表中序列28所示的氨基酸序列组成的多肽；15）将1）-14）中任一所示多肽的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有同样功能的由1）-14）中任一所示多肽衍生的多肽。

上述一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加为不超过10个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加。

编码上述多肽的基因也是本发明保护的范围。