[发明专利]测定黄连花葶中生物碱含量的方法

说明书

技术领域

本发明属于测定方法技术领域，尤其涉及一种测定黄连花葶中生物碱含量的方法。

背景技术

黄连花葶为毛茛科植物黄连的干燥花葶，摘除黄连花葶有利于生物碱成分的积累、降低植株养分消耗，仅重庆石柱每年就有200万公斤鲜花被丢弃，但黄连花葶作为黄连的副产物，其中小檗碱含量为1.16%，其含量与三颗针相近，具有润肠通便功能和降血脂作用，有一定的开发利用价值。黄连花葶中含有多种生物碱成分，文献采用分光光度法测定总生物碱、高效液相色谱法测定小檗碱含量，但未见有黄连花葶中除小檗碱以外其它主要生物碱的含量测定方法。

发明内容

本发明就是针对上述问题，提供一种简便、重复性好的测定黄连花葶中生物碱含量的方法。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案。

（1）采用十八烷基硅烷键合硅胶柱，以0.1%三乙胺溶液为流动相A，乙腈为流动相B进行梯度洗脱，流动相B的时间-浓度变化范围为0min～15min，15min～25min，25 min～40min，检测波长为270nm；流速为1mL·min^-1；柱温为30℃；理论塔板数按盐酸小檗碱峰计算不低于6000。

（2）称取盐酸药根碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱适量，以盐酸-甲醇分别制成1.06mg·mL^-1、0.48 mg·mL^-1、0.552 mg·mL^-1 的溶液，做为对照品储备液。

（3）分别吸取上述对照品储备液，以盐酸-甲醇制成16.96μg·mL^-1、57.6 μg·mL^-1、264.96 μg·mL^-1的混合溶液，作为混合对照品储备液。

（4）取混合对照品储备液置具塞锥形瓶中，加入盐酸-甲醇，密塞，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用盐酸-甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液测定。

作为一种优选方案，本发明所述步骤（1）中三乙胺溶液采用碳酸氢铵和氨水调PH为10而得。

作为另一种优选方案，本发明所述步骤（2）盐酸-甲醇比为1：100。

本发明有益效果。

本发明采用三乙胺为流动相改性剂，在碱性环境中对黄连花葶中的生物碱进行分离，可同时测定3种主要生物碱的含量。因此，本发明简便、重复性好，各生物碱峰分离良好，为黄连花葶的质量控制提供了依据。

具体实施方式

本发明采用如下技术方案。

（1）采用十八烷基硅烷键合硅胶柱，以0.1%三乙胺溶液为流动相A，乙腈为流动相B进行梯度洗脱，流动相B的时间-浓度变化范围为0min～15min，15min～25min，25 min～40min，检测波长为270nm；流速为1mL·min^-1；柱温为30℃；理论塔板数按盐酸小檗碱峰计算不低于6000。

（2）称取盐酸药根碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱适量，以盐酸-甲醇分别制成1.06mg·mL^-1、0.48 mg·mL^-1、0.552 mg·mL^-1 的溶液，做为对照品储备液。

（3）分别吸取上述对照品储备液，以盐酸-甲醇制成16.96μg·mL^-1、57.6 μg·mL^-1、264.96 μg·mL^-1的混合溶液，作为混合对照品储备液。

（4）取混合对照品储备液置具塞锥形瓶中，加入盐酸-甲醇，密塞，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用盐酸-甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液测定。