[发明专利]T-2毒素免疫亲和柱的制备方法

权利要求书

1.一种T-2毒素免疫亲和柱的制备，其特征在于，是由固相载体和预期偶联的T-2毒素单克隆抗体组成，具体步骤为：

  （1）偶联：取纯化后的T-2毒素单克隆抗体与溶胀后的CNBr-Sepharose 4B凝胶共同放置于偶联缓冲液中，室温下震荡偶联；

  （2）封闭：在偶联凝胶产物中加入其5～10倍体积的封闭缓冲液，室温下震荡反应2h；

  （3）洗涤：分别用5～10倍封闭后凝胶体积的醋酸盐缓冲液和Tris-HCL缓冲液交替洗涤3次，然后用5～10倍封闭后凝胶体积的PBS缓冲液洗涤2次，制备得到免疫亲和吸附剂；

  （4）装柱：将得到的免疫亲和吸附剂填充到固相萃取柱中，加入PBS缓冲液后自然沉降，得到T-2毒素免疫亲和柱，4度保存待用。

2.根据权利要求1所述的T-2毒素免疫亲和柱的制备方法，其特征在于所述的固相载体为CNBr-Sepharose 4B。

3.根据权利要求1所述的T-2毒素免疫亲和柱的制备方法，其特征在于所述的T-2毒素单克隆抗体与CNBr-Sepharose 4B干粉的质量比为1：80；所述的偶联缓冲液为0.1 mol/L NaHCO3溶液；溶解CNBr-Sepharose 4B干粉的缓冲液为1.0 mmol/L HCl。

4.根据权利要求1所述的T-2毒素免疫亲和柱的制备方法，其特征在于所述的封闭缓冲液为0.1 mol/L Tris-HCL（pH 8.0），以封闭未偶联的活化位点。

5.根据权利要求1所述的T-2毒素免疫亲和柱的制备方法，其特征在于其中步骤（3）中所述的醋酸盐缓冲液为0.1 mol/L、pH4.0的醋酸盐缓冲液；所述Tris-HCL缓冲液为0.1 mol/L、pH8.0 的Tris-HCL缓冲液。

6.T-2毒素免疫亲和柱可用于谷物及谷物制品检测T-2毒素残留的前处理方法。