[发明专利]蒸馏酒中氨基甲酸乙酯的高效液相色谱-质谱检测方法

说明书

技术领域

本发明属于分析化学领域，涉及蒸馏酒中氨基甲酸乙酯的高效液相色谱-质谱检测方法。

背景技术

氨基甲酸乙酯（Ethyl Carbamate，简称EC），又名尿烷，早在1943年EC就被证实为一种致癌物质，大量试验数据表明，EC在动物体内存在多种代谢方式，是一种具有遗传毒性且多位点致癌的物质，国际癌症研究所将其对人类的致癌毒性归为2B组。2007年，国际癌症研究机构（IARC）重新评估了EC，将其列入2A组，与铅、汞并列，这意味着EC对人类可能致癌。饮料酒中的氨基甲酸乙酯来源于其生产及贮存过程中，目前，只有有少数国家制定了饮料酒中EC的限量标准。

蒸馏酒中氨基甲酸乙酯的检测可用GC-MS（气相色谱-质谱）法、HPLC法等。GC-MS分析法准确，灵敏度高，但前处理方法较复杂（目前对样品所使用的前处理方法主要有液液萃取，固液萃取，固相萃取，固相微萃取等），所需时间也较长；HPLC（高效液相色谱）法需要对样品进行衍生处理（蒸馏酒中EC含量较低，紫外检测器无法检测ppb级的EC，因此，需要使用灵敏度相对较高的荧光检测器，而EC本身又不产生荧光，所以必须对EC进行衍生处理，使其带上荧光基团），相对于GC-MS分析法而言，HPLC法前处理较简单，但是灵敏度较低，色谱分离的时间也较长，且只依靠保留时间定性，准确性较差。

发明内容

本发明的目的是提供一种对蒸馏酒中的氨基甲酸乙酯进行定量检测方法。

本发明的技术方案是蒸馏酒中氨基甲酸乙酯的高效液相色谱-质谱检测方法，包括如下步骤：

（1）样品预处理：量取一定体积的蒸馏酒样品，在30~40℃下用旋转蒸发仪减压蒸馏除去样品中的乙醇，用蒸馏水定容至原来的体积，过滤；

（2）检测：取处理过的蒸馏酒样品直接进LC-MS（液相色谱-质谱），选择质子化氨基甲酸乙酯分子离子[M+H]⁺90.055为定量离子进行检测，经标准曲线的计算得到样品中氨基甲酸乙酯的含量。

进一步的，所述的液相色谱条件如下：流动相由A和B组成，其中A为含0.05~0.3%甲酸或乙酸的水溶液，B为乙腈或甲醇，洗脱梯度为流动相B：10%~100%，流速：0.2~0.6mL/min；色谱柱为C18柱。

进一步的，所述质谱条件如下：采用电喷雾离子源，毛细管电压4000V，毛细管出口电压55~135V，锥孔电压55~75V，离子源温度180~300℃，干燥气流量5~13L/min。

进一步的，所述的C18柱长50mm~250mm，内径为2.1mm或4.6mm。

进一步的，所述的洗脱梯度为：0~3min，10~100%B；3~8min，100%B；postime（后运行时间）：2min。

本发明方法创造性的将LC-MS应用到蒸馏酒中氨基甲酸乙酯的检测。发明人对检测过程中色谱和质谱的操作参数进行了选择，使得检测时间短，同时又能保证检测的准确性和灵敏度。此外，为了进一步提高检测的准确性，发明人对样品进行了预处理，该预处理方法操作简单、成本低廉。通过样品的预处理和检测过程的配合，使得本发明的方法操作简单，准确性和灵敏度都较高。因此，本发明方法为蒸馏酒中氨基甲酸乙酯的检测提供了新的选择。

附图说明

图1、浓度为50μg/L的基甲酸乙酯标准品提取离子轮廓图

图2、浓度为20μg/L的氨基甲酸乙酯标准品提取离子轮廓图

图3、样品1^#中氨基甲酸乙酯提取离子轮廓图

图4、样品2^#中氨基甲酸乙酯提取离子轮廓图

图5、样品3^#中氨基甲酸乙酯提取离子轮廓图

图1~5中纵坐标为采集点数，横坐标为采集时间。

具体实施方式

本发明的技术方案是蒸馏酒中氨基甲酸乙酯的高效液相色谱-质谱检测方法，包括如下步骤：

（1）样品预处理：量取一定体积的蒸馏酒样品，在30~40℃下用旋转蒸发仪减压蒸馏除去样品中的乙醇，用蒸馏水定容至原来的体积，过滤；

（2）检测：取处理过的蒸馏酒样品直接进LC-MS（液相色谱-质谱），选择质子化氨基甲酸乙酯分子离子[M+H]⁺90.055为定量离子进行检测，经标准曲线的回归方程计算得到样品中氨基甲酸乙酯的含量。