[发明专利]发酵制备高纯度赖氨酸硫酸盐的方法

权利要求书

1.发酵制备含L-赖氨酸硫酸盐的产品的方法，其包括：

(1)将编码氨基酸序列如SEQ ID No：l所示的蛋白或其变体的多核苷酸导入产L-赖氨酸的菌；

(2)在发酵条件下液体培养步骤(1)获得的菌，并收集培养的上清液，所述上清液中包含如下重量配比的氨基酸：

赖氨酸51～55份，优选为51.5～53.5份，更优选为52.3份；

天冬氨酸1.2～1.8份，优选为1.45～1.6份，更优选为1.54份；

苏氨酸0.8～1.1份，优选为0.9～1份，更优选为0.94份；

丝氨酸0.4～0.65份，优选为0.5～0.6份，更优选为0.56份；

谷氨酸2～3份，优选为2.2～2.6份，更优选为2.4份；

甘氨酸0.75～1.1份，优选为0.85～1份，更优选为0.92份；

丙氨酸1.2～1.6份，优选为1.3～1.5份，更优选为1.4份；

缬氨酸0.75～1.1份，优选为0.85～1份，更优选为0.93份；

甲硫氨酸0.3～0.5份，优选为0.35～0.48份，更优选为0.42份；

异亮氨酸0.45～0.75份，优选为0.55～0.65份，更优选为0.61份；

亮氨酸1～1.5份，优选为1.2～1.35份，更优选为1.27份；

酪氨酸0.5～0.8份，优选为0.6～0.75份，更优选为0.67份；

苯丙氨酸0.5～0.8份，优选为0.6～0.7份，更优选为0.64份；

组氨酸0.8～1.2份，优选为0.9～1.05份，更优选为0.97份；和，

精氨酸，0.9～1.3份，优选为1～1.2份，更优选为1.1份；

(3)取通过步骤(2)制备的上清液，进行纯化，得到赖氨酸纯度提高的级份，优选级份中赖氨酸纯度提高至75～95％(w/w)，更优选为76～92.6％(w/w)，更加优选为78～83％(w/w)，最优选为80.7％(w/w)；

(4)另取通过步骤(2)制备的上清液，加入硫酸，并任选进行浓缩，得到酸化的上清液；和

(5)将步骤(3)获得的级份加入硫酸，并喷入干燥机，在干燥机内形成颗粒核心，而后向该干燥机喷入步骤(4)获得的酸化的上清液，包裹上述颗粒核心，然后干燥至含水率小于3％(w/w)。

2.权利要求1所述的方法，其中纯化是层析纯化，优选是凝胶过滤层析纯化，更优选是Sephadex G-10层析纯化。

3.权利要求1所述的方法，其中，步骤(3)中所取的通过步骤(2)制备的上清液与步骤(4)中所另取的通过步骤(2)制备的上清液的体积比为0.5～1.5∶2～4，优选为0.75～1.25∶2.5～3.5，更优选为1∶3。

4.含L-赖氨酸硫酸盐的颗粒(其优选是饲料添加剂颗粒)，其包括颗粒核心和包裹该核心的外层，其中颗粒核心的L-赖氨酸含量为60～72％(w/w)，优选为61～70.6％(w/w)，更优选为62～65％(w/w)，最优选为63.5％(w/w)，外层的L-赖氨酸含量为51～55％(w/w)，优选为51.5～53.5％(w/w)，更优选为52.3％(w/w)。

5.权利要求4所述的颗粒，其含水率小于5％(w/w)，优选小于3％(w/w)，更优选小于2.5％(w/w)。

6.权利要求4所述的颗粒，其是由权利要求1～3之任一所述的方法制备的。

7.含L-赖氨酸硫酸盐的颗粒核心(其优选是饲料添加剂颗粒核心)，其中L-赖氨酸含量为60～72％(w/w)，优选为61～70.6％(w/w)，更优选为62～65％(w/w)，最优选为63.5％(w/w)。

8.权利要求7所述的颗粒核心，其是由权利要求1～3之任一所述的方法的步骤(1)、(2)、(3)和(5)制备的。

9.权利要求7或8所述的颗粒核心在制备含水率小于5％(w/w)(优选小于3％(w/w)，更优选小于2.5％(w/w))的含L-赖氨酸硫酸盐的饲料添加剂中的应用。

10.权利要求9所述的应用，其中含L-赖氨酸硫酸盐的饲料添加剂是权利要求4～6之任一所述的颗粒。