[发明专利]喹乙醇代谢物残留快速检测试纸条

说明书

技术领域

本发明涉及一种喹乙醇代谢物残留快速检测试纸条，属于食品安全快速检测领域。 

技术背景

喹乙醇是一种具有促生长作用的药物性添加剂，具有抗菌与蛋白同化作用，兼有促进生长作用。对革兰氏阴性菌如巴氏杆菌、鸡白痢沙门氏菌、大肠杆菌及变形杆菌等作用较强，对革兰氏阴性菌如金黄色葡萄球菌、链球菌等及密螺旋体亦有抑制作用。可促进蛋白质同化，增加瘦肉率，促进畜禽生长，提高饲料转化率，广泛用于猪、牛、鸡、羊的促进生长，抗菌治病和水生动物疾病的防治。用于饲料中，可通过胃肠系统的作用，提高饲料利用率。由于具有致突变和光敏毒性大多数国家禁止使用该药。由于喹乙醇曾经的广泛使用和较大危害性对其进行残留监控十分必要。喹乙醇本身不稳定,在动物体内能够在短时间内代谢;其在动物体内有十多种代谢产物,其中3-甲基喹恶啉-2-羧酸(MQCA)是主要代谢物在体内相对稳定是国家食品法典委员会认定的标示残留物。 

目前文献报道的MQCA残留分析可以采用HPLC、HPLC—MS/MS法分析测定，这些方法中一般都是先水解、再过固相萃取柱净化后上机测试，普遍存在检出限高、回收率较低和操作繁琐、耗时长的缺点，不适应现场大量样本的筛查。本研究运用免疫分析方法对喹乙醇及其代谢物进行检测；不仅能够灵敏快速地对大量样本进行检测及筛查，而且有助于质检机构更准确、有效地检测喹乙醇代谢物，更好地管理、利用喹乙醇避免含喹乙醇药物残留的水产品在国内市场流通；有效地防止国内含有喹乙醇药物残留的动物源食品进入国际市场而引起国际间贸易争端；同时也可防止国外不合格产品进入国内。对保障人体健康、提高人民生活质量，维护社会安定等具有重要的意义。 

发明内容

本发明的目的：研制出特异、敏感、快速、简便的喹乙醇代谢物残留快速检测试纸条。 

本发明的技术方案： 

一种喹乙醇代谢物残留快速检测试纸条，底层为支撑层，中间层吸附层固定在支撑层上，外层保护膜固定在吸附层上，吸附层从测试端依次为纤维层，吸附金标抗体纤维层，纤维素膜层及手柄端的吸水材料层，其中在纤维素膜层上有用偶联喹乙醇代谢物的载体蛋白溶液印制的直线式检测印迹，用羊抗或兔抗小鼠IgG溶液印制的直线式对照印迹，检测印迹和对照印迹平行组合排列为“Ⅱ”。支撑层是用不吸水的硬质塑胶片条或硬纸条制成。测试端纤维层用玻璃棉、或尼龙膜、或聚偏二氟乙烯(PVDF)膜、或聚酚膜制成，优选玻璃棉。吸水材料层用吸水纸制成。纤维素膜层用硝酸纤维素膜、或纯纤维素膜，或梭化纤维素膜制成。金标抗体纤维层用吸附喹乙醇代谢物的金标抗体玻璃棉，喹乙醇代谢物金标抗体为胶体金标记喹乙醇代谢物的单克隆抗体或多克隆抗体，偶联喹乙醇代谢物的载体蛋白溶液为喹乙醇代谢物与载体蛋白偶联的复合溶液。在测试端吸附纤维层、金标抗体纤维层及吸水材料层上覆盖有保护膜，在测试端纤维层与金标抗体纤维层交界处对应的保护膜上印制有样品标记线，该标记线偏向测试端纤维层一侧约0.5 cm处。偶联喹乙醇代谢物的载体蛋白为牛血清白蛋白(BSA )，或为鸡卵清白蛋白(OVA)，或为铁蛋白，或为血蓝蛋白。

本发明的喹乙醇代谢物残留快速检测试纸条具有以下优点： 

(1)特异性强，敏感性高。该试纸条以胶体金标记高亲和力的单克隆抗体为基础制备而成，金标抗体中金颗粒与抗体分子之间无共价键形成，二者通过异性电荷间的范德华力相结合，胶体金标对单克隆抗体特异性和亲和力影响很小，且具有较高的标记率。因此，快速检测试纸条具有较高的特异性和敏感性；

(2)操作简便、快速。使用本发明试纸条时无需任何其它试剂，只需滴加100 μl左右待检样品于样品垫上，在5分钟内即可判定检测结果；

(3)结果显示形象、直观、准确。本测试纸条以显示红棕色“I”及“Ⅱ”印迹作为检测的阳性和阴性标记，即在纤维素膜上显示一条棕红色“l”印迹表示在被检测样品液中含有喹乙醇代谢物，两条棕红色“Ⅱ”印迹表示在被检样品中不含喹乙醇代谢物，结果判定形象、直观、准确，简单明了，不易出现假阴性和假阳性误判；

(4)成本低，投资少。使用快速检测试纸条，不需另配仪器设备及其它试剂，随时随地进行检测，费用低廉，可节省大量贵重仪器及设备费用；

(5)应用范围广，便于推广应用。本发明快速检测试纸操作简单，能满足不同层次人员的需要，包括专业化验、海关检疫、卫生防疫、质量监测、畜产品加工、集约化养殖到个体养殖等，具有广阔的市场前景和较好的经济、社会效益。

附图说明