[发明专利]改性凝集素包裹的磁性大分子脂质体微球、制备方法及应用

说明书

技术领域

本发明涉及改性的功能化磁性纳米微球及相关临床检测及应用，进一步的说是一种改性凝集素包裹的磁性大分子脂质体纳米微球、制备方法及应用，属于功能化磁球及脂质体的制备及应用技术。

背景技术

磁性纳米粒子(MNP)是一类智能型的纳米磁性材料，既具有纳米材料所特有的性质如粒径小，比表面极大，偶连容量高，又具有磁响应性及超顺磁性，可以在恒定磁场下聚集和定位、在交变磁场下吸收电磁波产热。磁性聚合物微球兼具磁性纳米材料和聚合物的特征，己经成为当前纳米材料的研究热点之一。因磁性高分子微球同时兼具高分子微球的众多特性和磁响应性，因此不但能通过共聚及表面改性等方法赋予其表面功能基团，还能在外加磁场作用下方便、迅速地与介质分离。

磁性微球在生物医学上的应用主要包括：(a) 磁共振成像（MRI）：在疾病诊断领域的一个众所周知应用是使用MNP来作为造影剂用于磁共振成像MRI，该方式可以更好的区分健康的和病态的组织，并且可以看到人体内各种不同的生物学上的变异。氧化铁磁性纳米颗粒MNP由于具有低毒性已获得美国食品与药品管理局批准，被用于磁共振成像MRI信号的增强。(b) 磁性标记：另一种在诊断上的应用是对细胞、DNA和蛋白质等各种生物体来进行磁标记。比如用来标记干细胞以对人体内移植干细胞的分布及其变化情况进行无创伤的监测。(c) 可控药物释放: 磁性颗粒除了小尺寸和对人体的低毒性之外，所具备的另一个优势是可以在外磁场梯度的作用下运动，从而可渗透进人体组织的深处。(d) 磁高温疗法：是基于磁性颗粒能在随时间变化的磁场中被加热的性质。它的这种特性可用来“烧掉”癌细胞（高温疗法），它通常与化疗配合使用。(e)细胞隔离：外磁场与MNP间的吸引作用可用来分离很多种类的生物体。(f)免疫磁性微球：免疫磁性微球或叫做免疫磁性微珠简称免疫磁珠，是免疫微球的一种，是指连有抗体或抗原的磁性微球，它通过表面的抗体或抗原特异地与靶物质结合，从而赋予其磁响应性，在特定磁场的作用下，通过免疫磁性微球可以发生定向移动，从而实现其免疫学检测，分离纯化，药物导向等方面目的。理想的免疫磁性微球应具有灵敏性高，特异性强，重复性好以及分离检测速度快等优点。

采用高聚物包裹磁性纳米颗粒并与凝集素或亲和素结合制备凝集素修饰的纳米磁球，然后通过生物素-链亲和素系统与抗体和抗原结合，制备不同种类的免疫磁球，可利用磁性材料的快速分离特性，达到方便快捷的操作。有关凝集素或亲和素修饰的磁球，虽然国内外已有产品上市（如Invitrogen Dynal公司，陕西北美基因股份有限公司等），但仍然存在稳定性不足、功能单一等问题，如：凝集素等活性物质在磁球表面的接枝效率较低，较难保持抗体等的活性，较难满足具有高表面抗体含量磁珠的要求。为解决这一问题，本专利将结合高分子、脂质体、磁分离和生物检测等多项技术，开发一种高稳定性、高活性的凝集素磁球。常 津，梁晓飞等人报道的壳聚糖长链烷基季铵盐及阳离子高分子脂质体为本发明提供了相关研究基础（一类双亲性壳聚糖长链烷基季铵盐及其制备方法，申请号：200710056993.4；一种高分子脂质体及其应用，专利申请号：200810052465；梁晓飞等，载药磁性阳离子高聚物脂质体的制备及表征，高等化学学报，第29卷第4期，858-861），但本专利与以上专利的主要不同在于直接使用活性物质凝集素或亲和素的衍生物来直接包裹磁性纳米颗粒而达到磁球表面的高凝集素含量，专利的侧重点在于活性物质凝集素对磁球的改性方法为包裹，而不是普通的利用磁球表面所含氨基或羧基的偶联或接枝，凝集素对磁球的修饰过程不使用偶联剂；而以上文章“载药磁性阳离子高聚物脂质体的制备及表征”和专利“一种高分子脂质体及其应用”中，若进一步制备凝集素修饰的磁性纳米颗粒，则必须利用高分子脂质体表面所含的氨基或羧基，在偶联剂的作用下与凝集素再结合。

发明内容

本发明目的是提供一种改性凝集素包裹的磁性大分子脂质体纳米微球，主要为构建一种制备简单、成本低廉高效的功能化纳米磁球系统。

本发明的目的还是提供一种上述凝集素包裹的磁性大分子脂质体纳米微球的制备方法。

本发明另一目的是提供上述凝集素包裹的磁性大分子脂质体纳米微球的应用。