[发明专利]改性凝集素包裹的磁性大分子脂质体微球、制备方法及应用

权利要求书

1.改性凝集素包裹的磁性大分子脂质体纳米微球，其特征在于，粒径为1～100000nm的所述改性凝集素包裹的磁性大分子脂质体纳米微球具有如下结构：改性凝集素与脂质成分共同构成具有双层膜结构的脂质体，磁性纳米颗粒被包裹在所述脂质体的双层膜中间；所述改性凝集素、磁性纳米颗粒和脂质成分的质量百分比为0.01～50%：0.05～50%：0.01～50%；所述改性凝集素中凝集素与改性物的质量比为0.01～2：1；所述改性凝集素包裹的磁性大分子脂质体纳米微球具有超顺磁性且其饱和磁化强度为2.0～200.0emu/g；

所述改性凝集素是改性剂与凝集素反应后的产物；所述改性剂是十二烷基三甲基溴化铵、十四烷基三甲基溴化铵、十六烷基三甲基溴化铵、二甲基双十八烷基溴化铵、1，2-二油酰-3-二甲基-羟乙基溴化铵；或者是二甲基十八烷基环氧丙基氯化铵、二甲基十六烷基环氧丙基氯化铵、二甲基十四烷基环氧丙基氯化铵、二甲基十二烷基环氧丙基氯化铵或它们相应的溴化物；

所述凝集素选自扁豆凝集素、大豆凝集素、花生凝集素、刀豆素A、麦胚素、蓖麻凝集素、豌豆凝集素、菜豆凝集素、荆豆凝集素、双花扁豆凝集素、槐凝集素、链霉亲和素、生物素、牛血清白蛋白、Protein A、Protein G中的一种或几种；

所述磁性纳米颗粒是Fe₃O₄磁性纳米颗粒、钇铁氧体磁流体、钴纳米粒子、镍纳米粒子、金纳米粒子或银纳米粒子。

2.根据权利要求1所述的改性凝集素包裹的磁性大分子脂质体纳米微球，其特征在于，所述改性凝集素在极性有机溶剂或水中的溶解度范围为0.1mg/mL～20.0mg/mL，分子量为2～100KDa，改性凝集素中凝集素的质量含量为所述改性凝聚素包裹的磁性大分子脂质体纳米微球的0.5%～30%。

3.根据权利要求1所述的改性凝集素包裹的磁性大分子脂质体纳米微球，其特征在于，所述脂质成分选自胆固醇、二油酰脂酰乙醇胺、3β-[N-(N’，N’-二甲基胺乙基)胺基甲酰基］胆固醇、卵磷脂、二硬脂酰磷脂酰胆碱、棕榈酰油酰磷脂酰胆碱、二油酰磷脂酰乙醇胺、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺或棕榈酰油酰磷脂酰乙醇胺中的一种或几种。

4. 一种权利要求1至3任一所述的改性凝集素包裹的磁性大分子脂质体纳米微球的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

1）磁性纳米颗粒的制备：配置质量浓度为1.0～20.0%的含铁溶液，在通氮气条件下机械搅拌，待混匀后，加入质量浓度为25.0%的氨水，氨水体积为反应体系中水相体积百分比为1.0%～10.0%：100.0%，然后加入占整个反应体系总质量浓度为1.0%～10.0%的油酸，室温下继续搅拌反应3～10小时后停止反应，磁分离后得到所述磁性纳米颗粒；

2）改性凝集素的制备：将凝集素溶解到去离子水和醇的混合溶液中，再将改性物缓慢地加入到反应体系中，其中去离子水和醇的质量比为1：0～3；体系中凝集素和改性物的质量比为1：0.01～100；在室温下搅拌24小时后将反应液透析1～500小时，最后冻干，得改性凝集素的白色粉末；所述醇为甲醇、乙醇、或异丙醇；

3）步骤2）得到的改性凝集素与磁性纳米颗粒和脂质进行组装得到所述凝集素包裹的磁性大分子脂质体纳米微球，组装的方法为薄膜分散法、逆向蒸发法、复乳法、离心法、pH梯度法、注入法或混溶法，其中薄膜分散法或逆向蒸发法具体如下：

薄膜分散法的基本步骤为：

将步骤1）得到的磁性纳米颗粒和步骤2）得到的改性凝集素和脂质体共溶于极性有机溶剂中，所述改性凝集素、磁性纳米颗粒和脂质体的质量百分组成比为0.01%～50%：0.05%～50%：0.01%～50%；所述的极性有机溶剂是二氯甲烷、氯仿或丙酮；混匀后作为有机相，再除去所述极性有机溶剂使成薄膜，然后加入水相使所述薄膜水化，所述水相为0.9%的生理盐水或pH=5～9的磷酸盐缓冲溶液；

逆向蒸发法的基本步骤为：

将步骤1）得到的磁性纳米颗粒和步骤2）得到的改性凝集素和脂质体共溶于极性有机溶剂中，所述改性凝集素、磁性纳米颗粒和脂质体的质量百分组成比为0.01%～50%：0.05%～50%：0.01%～50%；所述极性有机溶剂指二氯甲烷、氯仿或丙酮；混匀后作为有机相，水相为0.9%的生理盐水或pH=6～9的磷酸盐缓冲溶液；将所述水相与有机相混合，超声乳化后，旋转蒸发除去有机溶剂；其中，水相和有机相的体积比为1：6～6：1。