[发明专利]烟草及烟草制品中三种苯氧羧酸类农药残留量的测定方法

权利要求书

1.一种烟草及烟草制品中三种苯氧羧酸类农药残留量的测定方法，其特征在于：用乙腈对样品进行浸提，再加入无水硫酸镁与氯化钠、柠檬酸钠、柠檬酸二氢钠振荡促使其分层，随后进行分散固相萃取，以液相色谱-串联质谱直接测定烟草及烟草制品中2,4-滴，2,4,5-涕和麦草畏农药残留量。

2.根据权利要求1所述的烟草及烟草制品中三种苯氧羧酸类农药残留量的测定方法，其特征在于：该测定方法具体步骤如下：

a、样品的提取：准确称取2 g样品于50 mL具盖离心管中，加入10 mL水，振荡直至样品被水充分浸润；静置10 min后移取10 mL乙腈至离心管中，加入200μL乙酸，然后将离心管置于涡漩混合振荡仪上，以2000 rpm 速率振荡1 min；将离心管置于-18 ℃条件下保持10 min，然后向离心管中加入4 g无水硫酸镁和1 g氯化钠，1 g柠檬酸钠和0.5 g 柠檬酸二氢钠，立即于漩涡混合振荡仪上，以2000 rpm速率振荡2 min，然后以4000 rpm速率离心10 min；

b、样品净化：移取上清液1.0 mL于1.5 mL离心管中，加入150 mg无水硫酸镁及25 mg PSA吸附剂，于漩涡混合振荡仪上以2000 rpm速率振荡2 min，以6000 rpm 速率离心2 min；吸取上清液经0.45 μLm有机相滤膜过滤，移取200 μL，加入800 μL乙腈，用LC-MS/MS检测；

c、标准工作溶液制备：分别称取0.01g 2,4-滴，2,4,5-涕和麦草畏标准品到不同的10mL容量瓶中，用乙腈稀释并最终配制成具有浓度梯度的各种农药的标准工作溶液；分别移取上述标准工作溶液200μL和200μL空白样品提取溶液，然后加入600μL乙腈，配制成基质混合标准工作溶液； 

d、液相色谱-串联质谱测定:吸取以上配制好的不同浓度的农药标准工作溶液，注入液相色谱-串联质谱仪；

e、农药残留量测定结果的计算

以外标法进行农药残留量的定量分析，即以农药的色谱峰面积与对其相应浓度进行回归分析，得到标准曲线，相关系数大于等于0.999,对提取后的样品进行测定，测得检出农药的色谱峰面积，代入标准曲线，求得样品中的2,4-滴，2,4,5-涕和麦草畏等农药的残留量。

3.根据权利要求1所述的烟草及烟草制品中三种苯氧羧酸类农药残留量的测定方法，其特征在于：所述标准工作溶液的配制方式如下：分别称取0.01 g 2,4-滴、2,4,5-涕和麦草畏三种农药标准品至不同的10 mL容量瓶中，用乙腈稀释定容，制得1.0 mg/mL的标准储备液；分别移取以上三种农药单一标准储备液1.0 mL于100 mL容量瓶中，用乙腈稀释定容至刻度；配得混合标准储备液（10 μg /mL）；分别移取混合标准储备液25μL, 50μL, 100μL, 250μL , 500μL 及1000 μL到6个10 mL容量瓶中，用乙腈定容；各标准工作溶液的浓度分别为0.025μg/mL, 0.05μg/mL, 0.1μg/mL, 0.25 μg/mL, 0.5μg/mL, 1.0μg/mL；分别移取上述标准工作溶液200μL和200 μL空白样品提取溶液混合，并加入600 μL乙腈；各溶液浓度分别为0.005μg/mL, 0.01μg/mL, 0.02μg/mL, 0.05 μg/mL, 0.1μg/mL, 0.2μg/mL。

4.根据权利要求1所述的烟草及烟草制品中三种苯氧羧酸类农药残留量的测定方法，其特征在于：采用的液相色谱条件为：色谱柱：Atiantis dC18 (150 mm×2.1 mm，3 um, 美国Waters公司)；流动相A为乙腈，流动相B为水（含0.1 %甲酸)，等度洗脱，流动相A和流动相B比例为50∶50，流速：0.3 mL/min；柱温：30 ℃；进样量：5μL；采用的质谱条件：扫描方式：负离子扫描; 电喷雾离子源(ESI); 雾化气流量为60 psi; 气帘气流量18 psi; 辅助加热气流量为60 psi; 离子化温度500 ℃; 碰撞气流量为10 psi; 4种气体均为氮气; 停留时间为100 msec; 电离电压5500 V, 负离子MRM模式采集。