[发明专利]特异性识别B-Raf突变蛋白的单克隆抗体、制备方法及其应用

权利要求书

1.特异性识别B-Raf突变蛋白的单克隆抗体,其特征在于，不能识别B-Raf野生型蛋白的单克隆抗体，或者抗原结合蛋白，该单克隆抗体特异性识别的B-Raf突变蛋白包括：第581位的天冬酰胺（Asparagine，N）突变为丝氨酸（Serine，S）的突变蛋白（B-Raf N581S）；第600位的缬氨酸（Valine，V）突变为谷氨酸（Glutamic Acid，E）的突变蛋白（B-Raf V600E）；或者第600位的缬氨酸（Valine，V）突变为赖氨酸（Lysine，K）的突变蛋白（B-Raf V600K）。

2.根据权利要求1所述的特异性识别B-Raf突变蛋白的单克隆抗体的制备方法，其特征在于，特异性结合于含有多肽序列SEQ ID NO:3的B-Raf蛋白。

3.根据权利要求1所述的特异性识别B-Raf突变蛋白的单克隆抗体的制备方法，其特征在于，特异性结合于含有多肽序列SEQ ID NO:1的B-Raf蛋白。

4.根据权利要求1所述的特异性识别B-Raf突变蛋白的单克隆抗体的制备方法，其特征在于，特异性结合于含有多肽序列SEQ ID NO:2的B-Raf蛋白。

5.根据权利要求1所述的特异性识别B-Raf突变蛋白的单克隆抗体的制备方法，其特征在于，包括抗原结合部位，由一条重链和一条轻链组成；重链和轻链的CDR1、CDR2以及CDR3的氨基酸序列分别是由中国典型培养物保藏中心（CCTCC）保藏号为CCTCC C2012112、CCTCC C201283/CCTCCC201284/CCTCC/C201285以及CCTCC C2012122的杂交瘤细胞产生的单克隆抗体的CDR1、CDR2以及CDR3的氨基酸序列决定。

6.根据权利要求5所述的特异性识别B-Raf突变蛋白的单克隆抗体的制备方法，其特征在于，包括抗原结合部位，所述杂交瘤细胞所产生的单克隆抗体重链和轻链的组成分别包含重链和轻链的可变区域。

7.根据权利要求5所述的特异性识别B-Raf突变蛋白的单克隆抗体的制备方法，其特征在于，包括抗原结合部位，包含有所述的杂交瘤细胞所产生的单克隆抗体的重链和轻链氨基酸序列。

8.根据权利要求1所述的特异性识别B-Raf突变蛋白的单克隆抗体，其特征在于，包括抗原结合部位，是一种人源化或者嵌合型抗体。

9.根据权利要求2至6及8任一项所述的特异性识别B-Raf突变蛋白的单克隆抗体的制备方法，其特征在于，所述单克隆抗体是一种IgG。

10.根据权利要求1所述的特异性识别B-Raf突变蛋白的单克隆抗体，其特征在于，保存在中国典型培养物保藏中心（CCTCC）的保藏号为CCTCCC2012112、CCTCC C201283/CCTCC C201284/CCTCC C201285以及CCTCCC2012122的三株杂交瘤细胞。

11.特异性识别B-Raf突变蛋白的单克隆抗体的应用，其特征在于，该单克隆抗体或者抗原结合部位的药物，以及可以药用的载体。

12.特异性识别B-Raf突变蛋白的单克隆抗体的应用，其特征在于，一种诊断B-Raf突变的诊断试剂盒，其组成含有权利要求1至7所述的任意一种单克隆抗体或者抗原结合部位。

13.特异性识别B-Raf突变蛋白的单克隆抗体的应用，其特征在于，一种诊断肿瘤的方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）用权利要求1至7所述的任意一种单克隆抗体或者抗原结合部位接触需要检测的生物样本；

（2）检测单克隆抗体或者抗原结合部位是否与样本发生结合，而结合指示样本存在癌症或者发展成癌症的风险。

14.根据权利要求13所述的特异性识别B-Raf突变蛋白的单克隆抗体的应用，其特征在于，所述诊断方法中，常见的癌症类型包括：直肠癌，乳头状甲状腺癌，胰腺癌，食道癌，前列腺癌，卵巢癌，肺癌。