[发明专利]一种制备南大戟内酯B的方法

说明书

技术领域

本发明属于天然药物化学领域，特别是涉及一种采用超临界CO₂萃取和高速逆流色谱分离技术制备南大戟内酯B的方法。

背景技术

南大戟内酯B为二萜类化合物，mp.212℃（分解），呈白色针晶状，分子式C₂₀H₂₆O₄，分子量330.42。南大戟内酯B在天然植物中广泛存在，主要从大戟科植物中分离得到。药理研究表明，南大戟内酯B具有促进神经生长因子形成的作用，可用于治疗脊柱损伤、末梢神经损伤、糖尿病性神经病和肌萎缩外侧变硬。另外，还具有抗癌活性，动物体内抗癌活性试验表明，南大戟内酯B有明显的抑制S180、艾氏腹水癌、肝癌腹水等细胞生长的活性。其抑制血管细胞粘附分子-1的形成，IC₅₀为0.2μg/mL，可用作转移抑制剂，用于治疗动脉硬化、移植排异、慢性风湿性关节炎和结节病等。

目前尚未见大量制备南大戟内酯B的方法报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种制备南大戟内酯B的方法。

为了实现上述目的，本发明的技术方案如下：

一种制备南大戟内酯B的方法，其特征在于包括以下步骤：取南大戟根粉碎过40-60目筛，加入萃取釜中，以体积百分比为75%的乙醇水溶液为夹带剂，采用超临界CO₂萃取，收集萃取液，回收乙醇后用庚烷脱脂，再以庚烷-乙酸乙酯-乙腈-水为溶剂系统，采用高速逆流色谱分离，流分减压干燥即得南大戟内酯B。

所述超临界CO₂萃取条件为：萃取温度为43-56℃，萃取压力为25-34MPa，分离釜Ⅰ温度为35-45℃，压力为8-10MPa，分离釜Ⅱ温度为25-38℃，压力为4-7MPa，夹带剂用量为原料的1-2倍量。

所述庚烷-乙酸乙酯-乙腈-水溶剂系统比例为（4-7）：（2-5）：（3-4）：（1-2）。

本发明中超临界CO₂萃取时间控制在2-4小时，CO₂流量控制在15-22L/h。

本发明在高速逆流色谱分离萃取物时，是以溶剂上相为固定相，下相为流动相，乙酸乙酯溶解萃取物，设备转速控制在700-900 rpm，流动相流速为1.5-3.0ml/min。

本发明优势在于：工艺采用超临界CO₂萃取和高速逆流色谱分离南大戟内酯B，分离过程无产品损失，制备周期短，试剂可以重复利用，制备量大，无废弃物产生，克服了传统硅胶柱分离过程中样品死吸附、工艺繁琐、重现性差的技术缺陷。

具体实施方式：

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

实施例1：

取南大戟根粉碎过60目，取3kg原料加入超临界CO₂萃取釜中，开启设备，调整设备参数：萃取温度为56℃，萃取压力为33.6MPa，分离釜Ⅰ温度为45℃，压力为9MPa，分离釜Ⅱ温度为37℃，压力为7MPa。通入CO₂流体，达到上述参数后，以CO₂液体20L/h流速萃取，并夹带75%乙醇水溶液6L，动态萃取4h，收集萃取液，回收乙醇，加庚烷脱脂，得到萃取物。取庚烷、乙酸乙酯、乙腈、水，按比例为4:5:3:1混合，取上相泵入分离柱，直至分离柱被固定相灌满，转速为850rpm，同时将下相以6ml/min的流速泵入，待流动相从出液端流出且两相建立动态平衡后，流动相流速调节为2.0ml/min，注入流动相溶解的萃取物，紫外检测器监测，收集南大戟内酯B流分，连续分离，合并流分减压干燥得南大戟内酯B，高效液相检测，含量94.2%。

实施例2：