[发明专利]一种盘果菊苷A的提取纯化方法

说明书

技术领域

本发明属于制药领域，具体涉及一种盘果菊苷A的提取纯化方法。

背景技术

盘果菊苷A（Prenantheside A)为倍半萜类化合物，分子式为C₂₁H₃₀O₉，分子量为426.46。呈无定形粉末状，来源于菊科植物槭叶盘果菊Prenanthe acerifolia Benth.全植物，槭叶盘果菊在我国河北、辽宁等省区有广泛分布。现代药理研究表明，盘果菊苷A具有一定的细胞毒活性，对L-5178Y细胞株的ID₅₀为4.0μg/mL。

经检索，尚无盘果菊苷A的工业生产方法的专利文献报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种盘果菊苷A的提取纯化方法。

本发明的盘果菊苷A的提取方法的技术方案包括以下步骤：

A．取槭叶盘果菊药材粉碎，用有机溶剂加热提取后，减压浓缩得粗提取物，将粗提取物悬溶于水，用水饱和正丁醇萃取4-5次，萃取液减压回收正丁醇至尽，得正丁醇萃取物；

B．将正丁醇萃取物湿法装柱，葡聚糖凝胶LH-20为吸附剂，用量为被分离样品量的20-30倍，以甲醇或乙醇水溶液洗脱，减压回收试剂并浓缩，得浓缩液；

C．将浓缩液进行高压硅胶柱层析，用石油醚-丙酮梯度洗脱，收集各洗脱部分，然后进行薄层层析收集含盘果菊苷A的流分，浓缩、干燥即得。

步骤A中所述提取用有机溶剂可选80-95%的乙醇、甲醇、丙酮溶液，提取方法可选回流、微波或超声提取。

步骤B中所述甲醇或乙醇的体积百分比浓度为50%-70%。

步骤C中所述高压硅胶柱的柱压为2.1-3.4MPa，柱内径为150-200mm，层析柱径高比为1:12-15，硅胶目数为100-300目。

本发明的优点在于：本发明通过提取、萃取、连续柱层析分离纯化以及结晶等步骤制备得到盘果菊苷A，耗时短、得率高、操作简单、易于工业化；且本发明所提供的盘果菊苷A的提取纯化方法所得产品含量高，为进一步开发利用提供了药理原料、理论及实践支持。

具体实施方式：

实施例1：

取槭叶盘果菊粗粉10kg，按质量比1:4加入85%的乙醇，65℃条件下加热回流提取1.5小时，提取2次，过滤，滤液减压回收得到粗提取物，将粗提取物加水混悬，用水饱和正丁醇萃取5次，合并正丁醇层，减压回收正丁醇至尽，装入Sephadex LH-20凝胶柱（用量为流浸膏的20倍）上，以60%乙醇洗脱，根据TLC合并洗脱液，减压回收试剂并浓缩，得到盘果菊苷A浓缩液，将浓缩液用甲醇溶解湿法上样至填料200-300目硅胶高压柱，其中高压柱的柱压为2.8MPa，柱内径为200mm，层析柱径高比为1:15，以石油醚-丙酮的混合溶剂，依次按体积比100:1、100:2、100:5、100:20洗脱，分段收集各流分，将含盘果菊苷A流分合并，减压回收溶剂，自然干燥得到盘果菊苷A54mg，含量为98.26%。

实施例2：

取槭叶盘果菊粗粉10kg，按质量比1:5加入80%的甲醇，60℃条件下加热回流提取2.0小时，提取3次，过滤，滤液减压回收得到粗提取物，将粗提取物加水混悬，用水饱和正丁醇萃取4次，合并正丁醇层，减压回收正丁醇至尽，装入Sephadex LH-20凝胶柱（用量为流浸膏的20倍）上，以55%乙醇洗脱，根据TLC合并洗脱液，减压回收试剂并浓缩，得到盘果菊苷A浓缩液，将浓缩液用甲醇溶解湿法上样至填料100-200目硅胶高压柱，其中高压柱的柱压为3.2MPa，柱内径为150mm，层析柱径高比为1:12，以石油醚-丙酮的混合溶剂，依次按体积比100:1、100:2、100:5、100:20洗脱，分段收集各流分，将含盘果菊苷A流分合并，减压回收溶剂，自然干燥得到盘果菊苷A48mg，含量为96.42%。

实施例3：