[发明专利]一种大葱细胞质雄性不育检测的试剂盒及其应用

说明书

技术领域

本发明属于农业育种领域，尤其涉及一种大葱细胞质雄性不育检测的试剂盒及其应用。 

背景技术

大葱(Allium fistulosum L.var.giganteum Makino)，植物学分类属于百合科(Liliaceae)、葱属(Allium)、葱种(fistulosum)中的一个变种(var.giganteum Makino)。以叶鞘抱合而成的肥大假茎(葱白)为主要产品，因在葱中植株高大而得名。 

大葱在葱蒜类蔬菜中占有非常重要的位置，是中国人日常生活中不可缺少的重要蔬菜作物之一。在中国普遍栽培，全国常年栽培大葱约计50多万hm2，年产大葱1760多万t。大葱主要分布在中国的秦岭-淮河以北地区。其中，山东、河南、河北、辽宁等省份栽培较为集中，单产水平也较高。 

大葱营养成分丰富，据测定每百克大葱含蛋白质1～2.4g，脂肪0.3g，碳水化合物6～8.6g，热量32千卡，粗纤维0.5g，钙12mg，磷46mg，铁0.6mg，胡萝卜素1.2mg，硫胺素0.08mg，核黄素0.05mg，尼克酸0.5mg，抗坏血酸14mg，所含胡萝卜素高于瓜菜类和豆菜类蔬菜。另外，大葱还含有挥发性的硫化丙烯等芳香物质，既可作为蔬菜和调味品，也具有良好的药用效果。 

大葱的管状叶和假茎(葱白)均可食用，生食或熟食皆宜。大葱是非常重要的香辛类蔬菜，其味辛，性温，食用可开胃消食、杀菌防病等。据明代李时珍《本草纲目》记载，葱之茎白、根须、叶、汁、花均可入药，对大葱不同部位的性质和治病作用已进行了详细阐述，记有54个药方，可 治10余种疾病。主治伤寒寒热，除肝邪气，治霍乱转筋，利大小便，解耳鸣。现代医学认为大葱具有刺激血液循环等功效。对痢疾杆菌、葡萄球菌等有杀灭作用。 

因为大葱生长周期较长，开花期较短，单果结籽数较少，自交衰退较明显等特点，所以开展大葱育种难度较大，从而限制了大葱育种研究工作的开展，国内外从事大葱育种研究的人员较少，因此，大葱育种研究相对滞后。 

长期以来，我国大葱育种一直以选种为主，各地栽培的大葱名产品种和推广的新品种，主要是采用选种方法育成。自上世纪70年代日本和我国才陆续开展了大葱雄性不育系及其利用研究，开始了大葱一代杂种选育，但是，一代杂种选育进展缓慢，至今在生产上没有得到较大面积推广。 

山东农业大学、山东省农业科学院蔬菜研究所、章丘市农业局、辽宁省农科院园艺系等单位，利用自然群体中的不育株，通过4-5代回交，先后育成大葱雄性不育系和相应保持系。陈立东、王景峰等育成了超早熟大葱雄性不育系603A、626A；张启沛、魏佑营等育成了大葱不育系4A、5A、225A、237A；佟成富、唐成英等育成了大葱不育系244A[佟成富，唐成英，崔连伟.大葱雄性不育系244A及其杂交种辽葱二号(9746F1)的选育及利用.全国蔬菜遗传育种学术讨论会论文集，2002.301-307]；陈运起、高莉敏等育成了大葱雄性不育系9801A、9802A等。 

为加快大葱雄性不育系选育进程，盖树鹏、孟祥栋等(2004)利用RAPD标记和SCAR标记初步建立了大葱不育系、保持系分子标记辅助选择的技术体系[盖树鹏，孟祥栋等.大葱雄性不育分子标记辅助选择的研究.分子植物育种，2004，2(2)：223-228]。可以减少工作量，缩短部分大葱品种的育种年限，但是不能在广泛的育种材料中实现苗期选择。 

加强生物技术与常规育种的结合生物技术的发展给园艺植物遗传育种带来了巨大的变化，分子标记技术已成为育种研究的重要组成部分。但 是，要使分子标记成为育种的一种常规手段，尚有许多问题有待解决。如重要性状基因的精细定位，检测过程的自动化，饱和遗传图谱的构建等。生物技术与常规育种相结合，将有力的推动大葱遗传育种学的发展。 

加快雄性不育系与一代杂种选育优良雄性不育系选育是选育一代杂种、利用杂种优势的重要前提，从大葱制种田发现不育株后，通过回交或体细胞杂交、细胞器转移、细胞质基因工程等技术转育成更多的优良雄性不育系，进而培育出优势明显的一代杂种。随着大葱育种研究的不断深入，大葱一代杂种选育与利用将进一步加快，大葱一代杂种的推广覆盖率将迅速提高。