[发明专利]一种抗体及其应用、制备方法

说明书

发明领域

本发明涉及人白介素-23受体胞外区结构域(hIL-23R-CHR)的特异性单克隆抗体及其用途，本发明还涉及产生上述单克隆抗体的杂交瘤细胞株9H3保藏号：CCTCC C201240。

背景技术

免疫系统的功能在于保护个体免受细菌、多细胞有机体和病毒等感染原及癌症的损害。这种系统包括若干类型的淋巴细胞和骨髓细胞：单核细胞、巨噬细胞、树突状细胞(DC)、嗜酸性粒细胞、T细胞、B细胞及中性粒细胞。这些淋巴细胞和髓系细胞通常产生称为细胞因子的信号蛋白(肽)。免疫反应包括炎症，即，免疫细胞在全身或在身体特定部位积聚。当感染原或外来物质入侵时，刺激免疫细胞分泌细胞因子，细胞因子继而调节免疫细胞的增殖、发育、分化或迁移。当免疫反应涉及过量的炎症因子时，它可能产生病理后果。

hIL-23与hIL-23R的关系

人白介素-12(hIL-12)是由p35和p40两个亚基组成的异二聚体细胞因子，主要由单核巨噬细胞(MΦ)和树突状细胞(DC)产生。hIL-12具有促进分化的CD4+T辅助细胞1(Th1)增殖，促进细胞毒性T细胞(CTL)的形成，提高NK细胞的细胞毒性，诱导T细胞和NK细胞产生INF-γ、TNF-α和IL-6等细胞因子，这些免疫细胞因子的过表达跟银屑病、克罗恩病(CD)、炎症性肠病(IBD)和风湿性关节炎(RA)等自身免疫疾病密切相关。而人白介素23(hIL-23)则是近期发现的类似于hIL-12的促炎症细胞因子，属于IL-12家族，由单独的p19亚单位和hIL-12的p40亚单位组成。hIL-23主要由活化的DCs、MΦ以及记忆性T细胞和NK细胞分泌。hIL-23在Th0向Th17细胞分化的起始及维持Th17分化、发育中起关键性作用。hIL-23能促进T细胞尤其是CD4+T细胞增殖，促进T细胞、抗原递呈细胞(APC)产生IFN-γ与IL-12，并对DC的共刺激功能起调节作用。近来的研究揭示hIL-23在银屑病、CD、IBD和RA等自身免疫性疾病发病机制中较hIL-12处于更重要的地位。因此，hIL-23和hIL-12拮抗剂研究与开发已成为相关疾病新药创制的焦点。

hIL-23的受体是由hIL-12β1与hIL-23R共同组成的受体复合物。除了hIL-12R的共有亚基hIL-12Rβ1，p19亚基特异性受体hIL-23R是造血因子受体超家族的一个新成员。hIL-23R包含一个细胞外区域、一个单跨膜区域和一个有252个氨基酸的胞质区域。其胞外区不同于其他造血因子受体超家族成员的三个膜纤维蛋白连接，而是由一个信号序列、一个N端免疫球蛋白样结构域和2个细胞因子受体区域组成。hIL-23与hIL-12共用Jak-stat信号分子，如Jak2、Tyk2、STAT1、STAT3、STAT4和STAT5，而hIL-23R主要是运用Jak2和STAT3信号分子。

hIL-23R与IL-17的关系

IL-17通常指的是IL-17A，属于IL-17家族，主要由Th17产生。Th17是最近研究发现的一类不同于Th1和Th2的CD4+T细胞亚群。目前Th17的调控机制仍不十分清楚，对于Th17分化过程的研究提出两种模型：一种认为，Th1和Th17的早期分化阶段是一致的，后期分化不同是由于hIL-12和hIL-23选择性的作用于同时表达hIL-12R/hIL-23R的“前Th1细胞”；另一个模型认为，Th1和Th17代表的是完全不同的细胞系，从一开始的分化过程就不同。后来证实的确存在与Th1无关的Th17分化途径。TGF-β和IL-6是Th17分化的启动者，hIL-23是Th17的活化和维持者。hIL-23在Th17细胞分化过程中具体的作用机制被认为与STAT-3有关，因为hIL-23可以介导STAT-3的磷酸化过程，使STAT-3激活从而促进IL-17的分泌。故hIL-23R对Th17细胞亚群来说是一个关键的作用因子。hIL23/hIL23R-Th17/IL17轴在自身免疫性疾病中的致病性也已被证实。减少被鼠白介素-23(mIL-23)刺激的IL-17的产生就可以减少EAE在小鼠模型中的发生，同时运用IL-17的抗体可以提供部分的保护作用。更进一步的研究表明，重组基因mIL-23p19能够加剧小鼠的结肠炎，相反抗mIL-23p19抗体的治疗就能够改善EAE。因此Th17细胞在炎症免疫性疾病中具有重要作用，可以作为一个新的药物作用靶分子。

hIL-23R与自身免疫性疾病的关系