[发明专利]一种从中药虎杖中制备白藜芦醇的工艺

说明书

技术领域

本发明涉及植物有效成分提取领域，具体是一种从中药虎杖中制备白藜芦醇的工艺。 

背景技术

白藜芦醇（又名芪三酚），化学名为3,4,5，-三羟基二苯乙烯（3,4,5，-trihydrolystilbene），是含有芪类结构的非黄酮多酚类化合物。白藜芦醇是植物在受到应激时自身合成的一种抗毒素，具有重要的顺利活性，在抑制癌细胞、降低血脂、预防心血管疾病、抗氧化、延缓衰老等方面有较显著的作用，被喻为继紫杉醇之后又一新的绿色抗癌药物。主要存在于虎杖、葡萄、花生等植物中，研究表明，虎杖中白藜芦醇的含量最高。 

查新发现，关于“从虎杖中提取白藜芦醇”方面的文献和专利已有报道。中国专利“从虎杖中制备高纯度白藜芦醇的工艺”（ZL201110125337）公开的是使用有机溶剂萃取，氧化铝柱层析分离纯化白藜芦醇，中国专利“一种从虎杖中提取纯化白藜芦醇的新方法”（ZL200510019788.1）公开的是采用酸催化水解，大孔吸附树脂分离纯化白藜芦醇，中国专利“虎杖苷和白藜芦醇的新制备方法”（ZL200310112538.3）公开的是采用聚酰胺层析法分离纯化白藜芦醇，中国专利“从虎杖中提取纯化98%以上的白藜芦醇的工艺”（ZL200810032067.8）是将虎杖先提取后发酵，采用专用的絮凝剂絮凝沉淀，氧化铝层析分离纯化白藜芦醇，目前采用碱水洗脱白藜芦醇的文献未见报道。 

发明内容

本发明的目的在于提供一种操作简单，成本低，快速制备白藜芦醇的方法，其工艺步骤如下： 

1）将虎杖药材干燥并粉碎，得虎杖粉； 

2）加水浸润虎杖粉，在浸润后的虎杖粉中加入复合酶，恒温发酵，使白藜芦醇的类似物虎杖苷转化成白藜芦醇； 

3）用乙醇回流提取； 

4）将提取液合并、过滤，浓缩；加入纯净水沉淀，离心，取上清液； 

5）上清液上大孔吸附树脂，开始用纯净水洗脱至无色，然后用碱水洗脱，收集碱水洗脱液，调pH=2.5-3.5，离心，取上清液； 

6）上清液继续上大孔吸附树脂，第一次用纯净水洗脱至无色，第二次用10%乙醇洗脱，弃去，第三次用50%～95%乙醇洗脱，收集洗脱液； 

7）将收集的洗脱液浓缩干燥。 

本发明的优选方案为： 

1）将虎杖药材干燥并粉碎，得虎杖粉； 

2）加水浸润虎杖粉，在浸润后的虎杖粉中加入复合酶，置于温度控制在35℃～60℃的容器内，恒温发酵24～72小时，使白藜芦醇的类似物虎杖苷转化成白藜芦醇； 

3）加入虎杖药材重量6～12倍的40-95%乙醇，回流提取； 

4）将提取液合并、过滤，浓缩回收乙醇至无醇味，加入1～3倍水沉淀，离心，取上清液； 

5）上清液上大孔吸附树脂，开始用纯净水洗脱至无色，然后用0.4%～1%的碱水洗脱，收集碱水洗脱液，用稀盐酸调pH=2.5-3.5，离心，取上清液； 

6）上清液继续上大孔吸附树脂，第一次用纯净水洗脱至无色，第二次用10%～35%乙醇洗脱2～3BV，弃去，第三次用50%～95%乙醇洗脱，收集3～6BV洗脱液； 

7）将收集洗脱液浓缩干燥。 

本发明提供的更优选技术方案为： 

（1）干燥虎杖药材粉碎到通过80目筛≥90%； 

（2）加水浸润虎杖粉；在复合酶中加入水，复合酶与水的比例为1（g）：150-250（ml），调pH=3-5，然后加入到浸润后的虎杖粉中，置于温度控制在50℃～60℃的容器内，恒温发酵50～60小时，使白藜芦醇的类似物虎杖苷转化成白藜芦醇； 

（3）加入虎杖药材重量8～12倍的80%乙醇，回流提取两次，每次1～2小时； 

（4）将两次虎杖提取液合并、过滤，浓缩回收乙醇至基本无醇味，加入1～3倍水沉淀，离心，取上清液； 

（5）上清液上大孔吸附树脂，开始用纯净水洗脱至基本无色，然后用0.4%～0.5%的碱水洗脱，收集碱水洗脱液，用0.5mol/L稀盐酸调pH=3，离心，取上清液； 

（6）上清液继续上大孔吸附树脂，第一次用纯净水洗脱至基本无色，第二次用20%～25%乙醇洗脱2～3BV，弃去，第三次用50%～60%乙醇洗脱，收集3～6BV洗脱液； 

（7）将收集的洗脱液浓缩干燥。