[发明专利]一种从中药虎杖中制备白藜芦醇的工艺

权利要求书

1.一种从中药虎杖中制备白藜芦醇的工艺，其特征在于，包括以下步骤：

1）将虎杖药材干燥并粉碎，得虎杖粉；

2）加水浸润虎杖粉，在浸润后的虎杖粉中加入复合酶，恒温发酵，使白藜芦醇的类似物虎杖苷转化成白藜芦醇；

3）用乙醇回流提取；

4）将提取液合并、过滤，浓缩；加入纯净水沉淀，离心，取上清液；

5）上清液上大孔吸附树脂，开始用纯净水洗脱至无色，然后用碱水洗脱，收集碱水洗脱液，调pH=2.5-3.5，离心，取上清液；

6）上清液继续上大孔吸附树脂，第一次用纯净水洗脱至无色，第二次用10%乙醇洗脱，弃去，第三次用50%～95%乙醇洗脱，收集洗脱液；

7）将收集的洗脱液浓缩干燥。

2.根据权利要求1所述的一种从中药虎杖中制备白藜芦醇的工艺，其特征在于，包括以下步骤：

1）将虎杖药材干燥并粉碎，得虎杖粉；

2）加水浸润虎杖粉，在浸润后的虎杖粉中加入复合酶，置于温度控制在35℃～60℃的容器内，恒温发酵24～72小时，使白藜芦醇的类似物虎杖苷转化成白藜芦醇；

3）加入虎杖药材重量6～12倍的40-95%乙醇，回流提取；

4）将提取液合并、过滤，浓缩回收乙醇至无醇味，加入1～3倍水沉淀，离心，取上清液；

5）上清液上大孔吸附树脂，开始用纯净水洗脱至无色，然后用0.4%～1%的碱水洗脱，收集碱水洗脱液，用稀盐酸调pH=2.5-3.5，离心，取上清液；

6）上清液继续上大孔吸附树脂，第一次用纯净水洗脱至无色，第二次用10%～35%乙醇洗脱2～3BV，弃去，第三次用50%～95%乙醇洗脱，收集3～6BV洗脱液；

7）将收集洗脱液浓缩干燥。

3.根据权利要求2所述的一种从中药虎杖中制备白藜芦醇的工艺，其特征在于，包括以下步骤：

（1）干燥虎杖药材粉碎到通过80目筛≥90%；

（2）加水浸润虎杖粉；在复合酶中加入水，复合酶与水的重量体积比为1：150-250，调pH=3-5，然后加入到浸润后的虎杖粉中，置于温度控制在50℃～60℃的容器内，恒温发酵50～60小时，使白藜芦醇的类似物虎杖苷转化成白藜芦醇；

（3）加入虎杖药材重量8～12倍的80%乙醇，回流提取两次，每次1～2小时；

（4）将两次虎杖提取液合并、过滤，浓缩回收乙醇至基本无醇味，加入1～3倍水沉淀，离心，取上清液；

（5）上清液上大孔吸附树脂，开始用纯净水洗脱至基本无色，然后用0.4%～0.5%的碱水洗脱，收集碱水洗脱液，用0.5mol/L稀盐酸调pH=3，离心，取上清液；

（6）上清液继续上大孔吸附树脂，第一次用纯净水洗脱至基本无色，第二次用20%～25%乙醇洗脱2～3BV，弃去，第三次用50%～60%乙醇洗脱，收集3～6BV洗脱液；

（7）将收集的洗脱液浓缩干燥。

4.根据权利要求3所述的一种从中药虎杖中制备白藜芦醇的工艺，其特征在于：

步骤（2）中的复合酶与水的重量体积比为复合酶：水=1g：200ml,调PH值至5。

5.根据权利要求1-4中任一权利要求所述的一种从中药虎杖中制备白藜芦醇的工艺，其特征在于：步骤（2）中所述复合酶的加入量与虎杖粉的重量比为：复合酶：虎杖粉=1-3:80-100。

6.根据权利要求5所述的一种从中药虎杖中制备白藜芦醇的工艺，其特征在于：步骤（2）中所述复合酶的加入量与虎杖粉的重量比为：复合酶：虎杖粉=1:100。

7.根据权利要求6中所述的一种从中药虎杖中制备白藜芦醇的工艺，其特征在于：所述的碱为强碱。

8.根据权利要求7中所述的一种从中药虎杖中制备白藜芦醇的工艺，其特征在于：所述的碱为如氢氧化钠、氢氧化钾。

9.根据权利要求8中所述的一种从中药虎杖中制备白藜芦醇的工艺，其特征在于：所述大孔吸附树脂选自的D101树脂或西安蓝晓科技有限公司的AB-8树脂。

10.根据权利要求9中所述的一种从中药虎杖中制备白藜芦醇的工艺，其特征在于包括如下步骤：

取干燥虎杖粉末100g，1g的复合酶加入200ml水中，调pH=5，然后拌入药材，50℃水浴上发酵60h。80%乙醇回流提取两次，第一次12倍量，1.5h，第二次10倍量，1h，过滤，合并提取液，浓缩至500ml，加入600ml水，离心，取上清液，上AB-8树脂，纯净水冲洗至基本无色，然后0.5%NaOH水溶液洗脱，收集3BV，0.5mol/L稀盐酸调pH=3，离心，取上清液，再上AB-8树脂，第一次用纯净水洗脱至基本无色，第二次用25%乙醇洗脱3BV，第三次用60%乙醇洗脱，收集5BV60%乙醇洗脱液，洗脱液浓缩、干燥，得白藜芦醇。