[发明专利]一类磁共振成像显像剂和双光子成像显像剂及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于显像剂技术领域，具体涉及磁共振成像的显像剂和双光子成像的显像剂及其制备方法。

背景技术

近年来，纳米材料作为成像探针已经被广泛报道和应用。《美国化学学会》子刊（J.Am.Chem.Soc.，2007，Vol.129,P.3848）报道了一种同时用于磁共振成像和光学成像的量子点成像剂。虽然这种成像剂具有较好的成像效果，但由于制备该成像剂首先要合成CdSe纳米粒子的内核，然后不仅要合成纳米粒子的外壳，还要修饰上水溶性的有机化合物，所以制备起来比较困难；而且由于在体外合成的纳米粒子具有细胞摄取率低，无特定靶向分子等缺点，也限制了这类成像剂的发展。德国化学会《应用化学》（Angew.Chem.Int.Ed.，2008，Vol.47(15),P.2804）介绍了一种“开关型”近红外金纳米成像剂及其制备方法，虽然该成像剂具有很好的生物相容性，但由于它是将光学分子修饰在金纳米表面，还要修饰上靶标特异性识别的肽段，合成比较繁琐，稳定性也不是很好。总之，现有的这些纳米显像剂普遍存在着制备难度高，体外合成的纳米粒子细胞摄取率低，容易被泵出和靶向困难等缺点，而成为限制生物学成像研究的瓶颈。

发明内容

本发明的目的是提出一类磁共振成像显像剂和双光子成像显像剂及其制备方法，以获得能实时控制性自组装的纳米显像剂，克服传统纳米显像剂制备难度高，细胞摄取率低、靶向困难等缺点。

本发明的磁共振成像显像剂和双光子成像显像剂的制备方法，其特征在于：

先分别合成两段肽段，按：将1毫摩尔2-氯三苯甲基氯树脂在4-6毫升N，N-二甲基甲酰胺里溶胀4-8分钟后，加入2毫摩尔N-芴甲氧羰基-N'-叔丁氧羰基-L-赖氨酸，再加入2毫摩尔N，N-二异丙基乙胺，反应2-3小时后，用100微升甲醇反应10-20分钟，切去赖氨酸的保护基，加入活化的1.6毫摩尔第二个氨基酸半胱氨酸反应2-3小时，切去半胱氨酸的保护基，加入活化的1.6毫摩尔第三个氨基酸精氨酸反应2-3小时，切去精氨酸的保护基，加入活化的1.6毫摩尔第四个氨基酸精氨酸反应2-3小时，切去精氨酸的保护基，加入活化的1.6毫摩尔第五个氨基酸缬氨酸反应2-3小时，切去缬氨酸的保护基，再加入活化的1.6毫摩尔第六个氨基酸精氨酸反应3-4小时，切去最后一个氨基酸精氨酸的保护基，加2-3毫摩尔醋酐反应20-30分钟，最后用含体积浓度为1%的三氟乙酸的二氯甲烷从该树脂上切下上述合成的肽段，用乙醚层析出冷冻离心倾去上层乙醚，待溶剂挥发干之后所得到的白色固体粉末即是赖氨酸-半胱氨酸-精氨酸-精氨酸-缬氨酸-精氨酸肽段；再按：将1毫摩尔2-氯三苯甲基氯树脂在4-6毫升N，N-二甲基甲酰胺里溶胀4-8分钟后，加入2毫摩尔第一个氨基酸缬氨酸，再加入2毫摩尔N，N-二异丙基乙胺，反应2-3小时后，用100微升甲醇反应10-20分钟，切去缬氨酸的保护基，加入活化的1.6毫摩尔第二个氨基酸精氨酸反应2-3小时，切去精氨酸的保护基，加入活化的1.6毫摩尔第三个氨基酸半胱氨酸反应2-3小时，切去半胱氨酸的保护基，加入活化的1.6毫摩尔第四个氨基酸精氨酸反应2-3小时，切去精氨酸的保护基，加入活化的1.6毫摩尔第五个氨基酸赖氨酸反应2-3小时，切去赖氨酸的保护基，再加入活化的1.6毫摩尔第六个氨基酸精氨酸反应3-4小时，切去最后一个氨基酸精氨酸的保护基，加2-3毫摩尔醋酐反应20-30分钟，最后用体积浓度为1%的三氟乙酸的二氯甲烷溶液从该树脂上切下上述合成的肽段，采用乙醚层析出冷冻离心倾去上层乙醚，待溶剂挥发干之后所得到的白色固体粉末即是缬氨酸-精氨酸-半胱氨酸-精氨酸-赖氨酸-精氨酸肽段；