[发明专利]马铃薯脱毒微型种薯的生产方法

说明书

技术领域

本发明属于马铃薯种薯生产领域。

背景技术

马铃薯是世界第四大粮食作物，它适应性强，产业链长，是重要的粮食经济兼用的作物和工业原料作物。

植物繁殖过程中入侵病毒的积累，导致马铃薯长势每年下降，收获的土豆越来越少，甚至绝产等等。

目前，采用马铃薯脱毒制微型种薯来防止马铃薯退化，但存在脱毒效率低和脱毒苗质量差的技术问题。

发明内容

本发明要解决现有马铃薯脱毒制微型种薯方法存在脱毒效率低和脱毒苗质量差的技术问题；而提供了马铃薯脱毒微型种薯的生产方法。

马铃薯脱毒微型种薯的生产方法，其特征在于马铃薯脱毒微型种薯的生产方法是按下述步骤进行的：

步骤一、以品种特征明显（即皮色、肉色、薯型、芽眼等符合特性要求）的生长健壮的优良植株所结的且无病斑、虫蛀和机械创伤的薯块作脱毒材料，先打破薯块的休眠，然后用温润沙覆盖，置于25℃黑暗条件下催芽，待茎尖长1cm时，转入光照培养箱进行高温处理20~25天，高温处理期间每天先在40℃高温处理2小时再在38℃高温处理22小时，高温处理第7天用0.1~0.5 mg /L赤霉素（GA3）+0.1~0.5 mg /L6-苄氨基喋呤(6BA) +0.1~0.5mg/LD-泛酸钙处理一次 (用脱脂棉蘸取配制好的液体，放于牙尖上处理5分钟)；

步骤二、然后剥取2~3cm长的茎尖，用自来水冲洗30min，再用70%~75%（质量浓度）乙醇浸泡30秒，随即用5%~7%（质量浓度）次氯酸钠溶液浸20分钟，再用无菌水冲洗3~4次；

步骤三、然后在实体解剖镜下，剖取带有1~2个叶原基（约0.2~0.3mm）的茎尖分生组织，进行离体培养，当苗的数量达到检测用量时，对苗进行PLRV、PVA、PVY、PVM、PVX、PVS、PSTV七种病毒进行检测，结果均为阴性即为脱毒苗；

步骤四、将脱毒苗接种于MS培养基中，置于培养室内，在培养室的温度保持在25℃，光照为2000~3000勒克斯，每天16小时光照条件下进行切段扩繁，炼苗，移栽至温室内进行肥水管理，培养至收获，获得微型薯。

本发明通过高温变温处理钝化植物体内病毒，去除病毒能力明显增强，能去除PLRV、PVA、PVY、PVM、PVX、PVS、PSTV七种病毒，同时保证植物的生长发育，增强脱毒效率。用赤霉素+6-苄氨基喋呤(6BA) +D-泛酸钙处理可以加速茎尖细胞的分裂和生长，从而提高茎尖的质量，取得好的脱毒效果。

生产出来的微型薯和由微型薯生产的原种一代试验品在黑龙江、内蒙古等地试种表现良好，田间长势和抗病性突出；可达到上市销售级别的原种二代试验品经过在惠州、青岛等地试种取得良好地效果，植株健壮，生长旺盛，抗病性明显增强，每667平方米产量可达8000斤以上，大薯率在90%以上，田间几乎没有烂薯，较传统的自留种（一般667平方米产量在2000斤以下）有非常明显的优势，取得了良好地经济效益。

具体实施方式：

具体实施方式一：本实施方式中马铃薯脱毒微型种薯的生产方法是按下述步骤进行的：

步骤一、以品种特征明显（即皮色、肉色、薯型、芽眼等符合特性要求）的生长健壮的优良植株所结的且无病斑、虫蛀和机械创伤的薯块作脱毒材料，先打破薯块的休眠，然后用温润沙覆盖，置于25℃黑暗条件下催芽，待茎尖长1cm时，转入光照培养箱进行高温处理20~25天，高温处理期间每天先在40℃高温处理2小时再在38℃高温处理22小时，高温处理第7天用0.1~0.5 mg /L赤霉素（GA3）+0.1~0.5 mg /L6-苄氨基喋呤(6BA) +0.1~0.5mg/LD-泛酸钙处理一次 (用脱脂棉蘸取配制好的液体，放于牙尖上处理5分钟)；

步骤二、然后剥取2~3cm长的茎尖，用自来水冲洗30min，再用70%~75%（质量浓度）乙醇浸泡30秒，随即用5%~7%（质量浓度）次氯酸钠溶液浸20分钟，再用无菌水冲洗3~4次；

步骤三、然后在实体解剖镜下，剖取带有1~2个叶原基（约0.2~0.3mm）的茎尖分生组织，进行离体培养，当苗的数量达到检测用量时，对苗进行PLRV、PVA、PVY、PVM、PVX、PVS、PSTV七种病毒进行检测，结果均为阴性即为脱毒苗；

步骤四、将脱毒苗接种于MS培养基中，置于培养室内，在培养室的温度保持在25℃，光照为2000~3000勒克斯，每天16小时光照条件下进行切段扩繁，炼苗，移栽至温室内进行肥水管理，培养至收获，获得微型薯；