[发明专利]可防治流感的siRNA及其药物组合物、医药用途

说明书

技术领域

本发明涉及医药技术领域，尤其涉及一种可防治流感的siRNA及其药物组合物、医药用途。

背景技术

流行性感冒病毒简称流感病毒，是一种造成人类及动物患流行性感冒的RNA病毒；流感病毒可依据其中的核蛋白(NP)和基质蛋白(M)分为四个属:甲型(A)、乙型(B)、丙型(C)和类托高土病毒属。甲型流感广泛存在于人类及其他动物中，其感染范围广，呈流行形式出现，危害也最严重；乙型仅存在于人类，常引起流感的局部爆发；丙型流感存在于人类和猪中，极少流行。

流感病毒主要通过感染人类呼吸道上皮细胞而进入宿主体内，导致各种全身症状，甚至严重的并发症！呼吸道上皮细胞表面的唾液酸分子则作为流感病毒吸附的受体而与流感病毒感染密切相关。人源的流感病毒偏向于识别α-2,6-唾液酸链接作为受体，而禽源的流感病毒则偏向于α-2,3-唾液酸链接作为受体。

唾液酸分子链接在细胞表面的糖蛋白和糖脂的末端，在各组生物学进程（如免疫原识别、病毒感染和细胞吸附等）中起重要作用。唾液酸转移酶是一类主要的调节细胞表面的唾液酸分子含量的酶类。人类基因组编码大约20多种涉及糖蛋白和糖脂唾液酸化的唾液酸转移酶。最新的研究证实，β-半乳糖α-2,6-唾液酸转移酶I（ST6GAL I）负责将α-2,6-唾液酸加到糖蛋白类聚糖的N-链接和一些O-链接的GALβ1-4GlcNAc（一种二糖）上；而β-半乳糖α-2,3-唾液酸转移酶IV（ST3GAL IV）则主要负责α-2,3-唾液酸加到糖蛋白类聚糖的N-链接和一些O-链接的GALβ1-4GlcNAc上。编码ST6GAL I和ST3GAL IV的基因在人类呼吸道高表达，这提示这两种酶与流感病毒主要感染人类呼吸道的机制相关，并有可能成为预防和治疗流感病毒的靶点。目前已公开的有关研究中，尚未见利用制备靶向ST6GAL1和ST3GAL4基因的siRNA用于抑制多种流感病毒亚型，尤其是减少流感病毒吸附而减少感染的报道。

    小干扰RNA（siRNA）是一类长度约为21bp的双链RNA，当其被导入细胞后，会介导与其序列相对应的mRNA降解，从而起到特异性抑制靶基因表达，这种现象称作RNA干扰机制。近年来，RNA干扰技术飞速发展，被广泛应用于生命科学的各个领域，包括抗病毒疗法方面，例如，已有研究证实针对各类病毒的基因（包括HIV、脊髓灰质炎病毒、丙型肝炎病毒、西尼罗河病毒和流感病毒）设计特异靶向的siRNA可在体内外起到有效抗病毒作用。但是针对流感病毒感染所必需的、宿主本身的基因而设计的siRNA进行抗病毒的研究则较少报道。

目前可用于治疗和预防流感病毒的抗病毒药物主要有神经氨酸酶抑制剂 (NAI) ，如奥司他韦和扎那米韦；以及M2离子通道抑制剂金刚烷胺类，包括金刚烷胺和金刚乙胺。但以上两类化合药物有着各种副作用以及局限性，如易产生耐药性等，这也成为临床治疗及新药开发的重要问题。

终上所述，研发新型的特异性更高、不易产生耐药性的抗流感药物成为业内亟待解决的问题。同时，针对流感病毒感染所必需的基因，设计特异性强的靶向型药物，并进行研究和应用也成为业内的迫切需要。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明设计靶向ST6GAL1和ST3GAL4基因的siRNA，明确其抗病毒效果及其作用机制，为开发新型的靶向性的siRNA抗流感病毒药物提供基础数据。

本发明的目的之一是提供一种双链siRNA，其可以抑制人呼吸道上皮细胞表面的人源甲型流感病毒唾液酸受体（SAa2,6GAL）的表达，从而减少人源甲型流感病毒的吸附与感染。

本发明的另一目的是提供一种双链siRNA，其可以抑制人呼吸道上皮细胞表面的禽源甲型流感病毒唾液酸受体（SAa2,3GAL）的表达，从而减少禽源甲型流感病毒的吸附与感染。

本发明的另一目的是提供了其活性成份为上述siRNA序列的药物组合物，用于减少多种流感病毒亚型的吸附而抑制感染。

本发明的另一目的是提供了所述siRNA的医药用途，用于制备可防治流感病毒的药物组合物、药物以及预防制剂。

针对上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了靶向ST6GAL1和ST3GAL4基因的siRNA，所述siRNA为以下至少一种：

siST6GAL1_001:正义链碱基组成为SEQ ID NO.1，反义链碱基组成为SEQ ID NO.2;

siST6GAL1_002:正义链碱基组成为SEQ ID NO.3，反义链碱基组成为SEQ ID NO.4;