[发明专利]药用猴头菌菌丝体固体液体混合培养的方法

权利要求书

1.一种药用猴头菌菌丝体固体液体混合培养的方法，包括以下步骤：下 述物质的百分数均为重量百分数，

(1).配制固体培养基

加入余量的水，pH值6～7.5，混合均匀，118～121℃灭菌，25～30分 钟；

(2).菌种的优化筛选及子实体分离；

采选中条山原始森林中的野生猴头菇中生长强壮、发育良好、没有病虫 害、种子没散落的子实体；

在接种室100级以上超净工作台内，将猴头菇子实体浸入75％的酒精中 消毒1～2分钟，取出后用蒸馏水冲洗干净，再用消毒纱布擦干，将子实体放 在培养皿上，用钟形罩用具覆盖，室温保持在18～20℃，使子实体缓慢生长， 过2～3天后，种子即散出来，落入装有步骤(1)培养基的培养皿中，然后用镊 子蘸取落下的种子，用划线法接种于试管的斜面上培养，在22～25℃下培养 4～5天种子即会萌发，待菌丝基本长满斜面时，选择色白、基内菌丝发达粗 壮、菌束明显的，置入摇床瓶接种备用；

(3).菌种的培养

接种前，接种口应先用常规方法消毒，即用75％酒精浸泡过的脱脂棉球 擦试，后开启臭氧发生器，使其出风口始终对着接种口，在接种口周围形成 一个局部无菌区，然后用消过毒的无毒橡胶管套于接种管口上，将经过孢子 分离的摇床瓶菌种接入装有步骤(1)培养基的罐内，接种量为9％～11％，全部 过程均在无菌条件下进行，接种后开搅拌机，搅拌速度200转/分，恒温25 ℃，培养2天；

(4).液体深层培养：

4.1种子罐培养基为：

加入余量的水，118～121℃灭菌28～32分；

4.2将步骤(3)培养好的菌种接种至种子罐，25～27℃，培养3～4天， 至结果为：

①.镜检：菌丝呈树枝状，无杂菌；

②.外观：液体中有较多的白球状粒；

(5).菌丝体培养：

麸皮40％，甘草药渣20％，延胡索药渣10％，玉米面10％，谷糠10％，玉 米棒5％，木屑5％；加水混匀，再加入总量的1％的石膏，搅拌均匀，分装在 聚丙烯小袋中，118～121℃灭菌115～120分钟，在100级无菌区中接入步骤 4.2的固体菌种，接种量为1/30，前12天26～28℃，后28天在23～25℃中 培养，待菌丝生长满后掰块55～65℃烘干，即得猴头菌丝体。