[发明专利]一种鞘氨醇杆菌及利用其制备左乙拉西坦酸的方法有效
申请号: | 201210283040.2 | 申请日: | 2012-08-10 |
公开(公告)号: | CN102851238A | 公开(公告)日: | 2013-01-02 |
发明(设计)人: | 徐毅;陈晨;陈建波 | 申请(专利权)人: | 上海应用技术学院 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12P41/00;C12P17/10;C12R1/01 |
代理公司: | 上海申汇专利代理有限公司 31001 | 代理人: | 吴宝根 |
地址: | 200235 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 鞘氨醇 杆菌 利用 制备 左乙拉西坦酸 方法 | ||
1.一种鞘氨醇杆菌(Sphingobacterium sp.) SIT102,CGMCC NO. 6158。
2.如权利要求1所述的鞘氨醇杆菌SIT102的培养方法,其特征在于步骤如下:
以葡萄糖为碳源、以蛋白胨为氮源将鞘氨醇杆菌SIT102进行发酵培养,培养过程中控制pH为7.0、温度为25~35℃,时间为24~48h。
3.利用权利要求1所述的鞘氨醇杆菌SIT102作为生物催化剂催化外消旋乙拉西坦酸酯进行对映选择性水解产生左乙拉西坦酸的方法,其特征在于具体包括下列步骤:
(1)、鞘氨醇杆菌SIT102的培养,即以葡萄糖10.0g/L,蛋白胨20.0g/L,KH2PO4 1g/L, K2HPO4 2g/L,MgSO4 0.5g/L为发酵培养基,将4℃保存的鞘氨醇杆菌SIT102斜面菌种进行发酵培养,培养过程中控制pH为7.0、温度为25~35℃,时间为24~48h后离心收获鞘氨醇杆菌SIT102菌体,然后将所得的鞘氨醇杆菌SIT102菌体置于缓冲溶液中;
(2)、向步骤(1)所得的缓冲溶液中加入外消旋乙拉西坦酸酯,其经鞘氨醇杆菌SIT102菌体催化进行对映选择性水解反应后得反应液;
上述的对映选择性水解反应过程控制反应温度为20~40℃,反应时间为3~48h;
上述的对映选择性水解反应过程中所用的鞘氨醇杆菌SIT102细胞量、外消旋乙拉西坦酸酯的量和缓冲溶液的量按鞘氨醇杆菌SIT102细胞湿重: 外消旋乙拉西坦酸酯:缓冲溶液体积为5~150g:5~100mmol:1L计算;
上述的外消旋乙拉西坦酸酯的结构式如下:
其中的R为C1~C3烷基;
(3)、将步骤(2)所得的反应液进行分离、纯化,最终得到目标产物左乙拉西坦酸;
所述的左乙拉西坦酸的结构式如下:
。
4.如权利要求3所述的利用鞘氨醇杆菌SIT102作为生物催化剂催化外消旋乙拉西坦酸酯进行对映选择性水解产生左乙拉西坦酸的方法,其特征在于步骤(1)中所述的缓冲溶液为磷酸钾缓冲溶液,其pH值为6.5~7.5。
5.如权利要求3或4所述的利用鞘氨醇杆菌SIT102作为生物催化剂催化外消旋乙拉西坦酸酯进行对映选择性水解产生左乙拉西坦酸的方法,其特征在于步骤(2)中所述的外消旋乙拉西坦酸酯是通过外消旋的乙拉西坦酸与无水甲醇或无水乙醇在三甲基氯硅烷催化作用下合成的。
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