[发明专利]与万古霉素形成抗菌增效包合物的组分和制备方法及其应用

说明书

  

技术领域

本发明涉及万古霉素vancomycin与β-环糊精衍生物6-[（L-苯丙氨酰）-胺基]-β-环糊精Per-6-[(phenylalanyl)-amino]-b-cyclodextrin盐酸盐形成包合物的制备方法、化学构象分析、抗菌增效效果及其增效机理，以及这种万古霉素包合物抗菌增效的应用。 

背景技术

万古霉素是目前临床上对付耐甲氧西林金黄色葡萄球（methicillin-resistant Staphylococcu saureus，简称MRSA）的首选药物，它属于结构较为复杂的糖肽类抗生素。万古霉素的抗菌作用机理已被证实是通过形成氢键与细菌的细胞壁NAM/NAG肽类上C-终端上的L-Lys-D-Ala-D-Ala 五个点位相结合，从而抑制细菌的细胞壁的合成而达到抗菌作用。但随着抗生素的滥用，临床上万古霉素对MRSA的敏感度开有较快下降的趋势。这现象在我国尤为严重。如何保持万古霉素对MRSA的敏感度，延长它在临床上的使用周期将是抗生素耐药性问题的一种挑战。  

     环糊精是一类天然环低聚糖化合物，常见的有α、β及γ-环糊精。其中β-环糊精最为常见，它是由七个α-D-葡萄糖单元经1，4-糖苷键环状连接而成。与其它环糊精一样，其分子结构中含有一个亲水性外表面和一个疏水性内空洞，表现为一个宽圆边为亲水性，和一个窄圆边则呈现疏水性。这一特性使其与许多化合物能形成内含复合物即包合物。因此，它与客体化合物即形成包合物的能力、包合物的性质及机能取决于宽圆边的亲水性及窄圆边的取代基的性能。环糊精与客体化合物并非是由分子中原子间的共价键形成包合物，而是分子间的空间作用形成的。因此包合物具有客体化合物原有的一切功能。NMR即核磁共振图谱是研究溶液中包合物的最直接和最有效的工具和方法，尤其是¹H NMR即质子核磁共振图谱，通过环糊精与客体化合物形成包合物前后其结构中质子的化学位移的微小变化，准确地解析包合物的形成及其结构包括空间结构，得到客体化合物在包合物中的空间化学环境信息包括其化学结构的构象。

 本发明的目的是依据β-环糊精的结构特征及万古霉素抗菌活性的生化作用机理，选用b-环糊精衍生物6-[（L-苯丙氨酰）-胺基]-β-环糊精（1）作为主体化合物，与客体化合物万古霉素形成包合物的制备方法以及测定包合物的体外抗菌增效效果。利用¹H NMR图谱及包合物的化学结构构象分析，并结合万古霉素抗菌活性的生化作用机理，对万古霉素与6-[（L-苯丙氨酰）-胺基]-β-环糊精（1）形成的包合物的抗菌增效机理进行阐述。   

发明内容

本发明旨在提供一种能使万古霉素抗菌活性增强的包合物的制备方法。这种包合物是由一种β-环糊精衍生物6-[（L-苯丙氨酰）-胺基]-β-环糊精（1）作为主体化合物与客体化合物万古霉素形成的。该包合物体外抗菌活性实验显示，万古霉素在形成包合物后对多种细菌菌株尤其是耐甲氧西林金黄色葡萄球即MRSA的抗菌活性有较强的增效效果。利用¹H NMR实验，通过对包合物的化学结构构象分析，并结合万古霉素抗菌活性的原生化作用机理，阐明万古霉素与6-[（L-苯丙氨酰）-胺基]-β-环糊精（1）形成的包合物的抗菌增效机理。   

    本发明人从事β-环糊精衍生物制备设计及其与抗生素形成包合物的研究多年。下面就用于本发明的万古霉素与6-[（L-苯丙氨酰）-胺基]-β-环糊精盐酸盐（1）包合物的制备方法、万古霉素在形成包合物后的体外抗菌活性增效效果、包合物的¹H NMR数据以及化学结构构象分析并对包合物的抗菌增效机理进行阐述。    

1.   万古霉素与6-[（L-苯丙氨酰）-胺基]-β-环糊精（1）形成包合物的制备方法  

  1.1. 制备方法一：

   万古霉素和6-[（L-苯丙氨酰）-胺基]-β-环糊精（1）按组分摩尔比例0．5～2.0分别溶于水，二者水溶液混合均匀，混合液用冷冻干燥方法干燥，即得万古霉素和6-[（L-苯丙氨酰）-胺基]-β-环糊精（1）冻干粉包合物。

1.2. 制备方法二：