[发明专利]定量检测人乳腺癌特异性基因1 mRNA表达水平的试剂盒

权利要求书

1.用于检测人乳腺癌特异性基因1mRNA表达量的试剂盒，其特征在于：含有由序列表序列1所示的一条引物和序列表序列2所示的另一条引物组成的引物对。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒中含有核苷酸序列如序列表序列3所示的探针。

3.根据权利要求1或2所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒中含有尿嘧啶DNA糖基化酶。

4.根据权利要求1-3中任一所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒中含有如下组成的PCR反应缓冲液：由终浓度为17.9-19.5mmol/L的三（羟甲基）氨基甲烷盐酸盐、终浓度为2.55-2.90mmol/L的氯化镁和终浓度为90.0-96.3mmol/L的氯化钾组成，溶剂为水；其中，所述终浓度均为各物质在所述PCR反应缓冲液中的终浓度。

5.根据权利要求2-4中任一所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒中含有如下组成的PCR反应液：由所述PCR反应缓冲液、DNA聚合酶、dATP、dCTP、dGTP、dTTP、dUTP、权利要求1中所述引物对、权利要求2中所述探针和尿嘧啶DNA糖基化酶组成，其余为水。

6.根据权利要求1-5中任一所述的试剂盒，其特征在于：

所述PCR反应缓冲液在所述PCR反应液中的浓度为0.9μl/μl；

所述DNA聚合酶在所述PCR反应液中的浓度为0.08-0.14U/μl；

所述dATP在所述PCR反应液中的浓度为370-420nmol/L；

所述dCTP在所述PCR反应液中的浓度为370-420nmol/L；

所述dGTP在所述PCR反应液中的浓度为370-420nmol/L；

所述dTTP在所述PCR反应液中的浓度为180-215nmol/L；

所述dUTP在所述PCR反应液中的浓度为370-420nmol/L；

每条所述引物在所述PCR反应液中的浓度为0.28-0.42μmol/L；

所述探针在所述PCR反应液中的浓度为0.17-0.25μmol/L；

所述尿嘧啶DNA糖基化酶在所述PCR反应液中的浓度为0.0150-0.0180U/μl。

7.根据权利要求1-6中任一所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒中含有反转录缓冲液；所述反转录缓冲液由如下物质组成：终浓度为8.0-9.8μmol/L的Oligo(dT)_12-18、终浓度为3.15-4.0U/μl的RNA酶抑制剂、终浓度为70.0-76.0mmol/L的二硫苏糖醇、终浓度为170-195mmol/L的三（羟甲基）氨基甲烷盐酸盐、终浓度为255-290mmol/L的氯化钾、终浓度为9.25-12.5mmol/L的氯化镁，其余为水；其中，所述终浓度均为各物质在所述反转录缓冲液中的浓度。

8.根据权利要求1-7中任一所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒中含有反转录反应液；所述反转录反应液由所述反转录缓冲液、dATP、dCTP、dGTP、dTTP、逆转录酶组成；其余为水；

所述反转录缓冲液在反转录反应液中的浓度为0.786μl/μl；

所述dATP在反转录反应液中的浓度为1.30-1.60mmol/L；

所述dCTP在反转录反应液中的浓度为1.30-1.60mmol/L；

所述dGTP在反转录反应液中的浓度为1.30-1.60mmol/L；

所述dTTP在反转录反应液中的浓度为1.30-1.60mmol/L；

所述逆转录酶在反转录反应液中的浓度为11.5-16.5U/μl。