[发明专利]TrMAK蛋白在调节纤维素酶产量中的应用有效
| 申请号： | 201210247669.1 | 申请日： | 2012-07-17 |
| 公开（公告）号： | CN102776131A | 公开（公告）日： | 2012-11-14 |
| 发明（设计）人： | 董志扬;陈秀珍;陈飞 | 申请（专利权）人： | 中国科学院微生物研究所 |
| 主分类号： | C12N1/15 | 分类号： | C12N1/15;C12N15/80;C12N9/42;C12R1/885 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 关畅 |
| 地址： | 100101 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | trmak 蛋白 调节 纤维素酶 产量 中的 应用 | ||
1.一种构建工程菌的方法，包括如下步骤：抑制木霉中TrMAK基因的表达，得到工程菌；所述TrMAK基因编码如下（a）或（b）所述的TrMAK蛋白：
（a）由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；
（b）将序列1的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与木霉中的纤维素酶合成相关的由序列1衍生的蛋白质。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述TrMAK基因为如下1）至4）中任一所述的DNA分子：
1）序列表的序列2所示的DNA分子；
2）序列表的序列3所示的DNA分子；
3）在严格条件下与1）或2）限定的DNA序列杂交且编码所述蛋白的DNA分子；
4）与1）或2）限定的DNA序列具有90%以上同源性且编码所述蛋白的DNA分子。
3.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述“抑制木霉中TrMAK基因的表达”的实现方法如下：通过同源重组敲除木霉中的所述TrMAK基因。
4.如权利要求3所述的方法，其特征在于：所述“通过同源重组敲除木霉中的所述TrMAK基因”的实现方法如下：将含有DNA片段甲的重组质粒导入所述木霉中；所述DNA片段甲自上游至下游依次包括所述TrMAK基因的上游同源臂和所述TrMAK基因的下游同源臂。
5.如权利要求4所述的方法，其特征在于：所述DNA片段甲中，在所述上游同源臂和所述下游同源臂之间还具有筛选标记基因。
6.如权利要求1至5中任一所述的方法，其特征在于：所述木霉为里氏木霉。
7.权利要求1至6中任一所述方法得到的工程菌。
8.一种生产纤维素酶的方法，包括如下步骤：发酵权利要求7所述工程菌，得到纤维素酶。
9.抑制TrMAK基因表达的物质在促进木霉生产纤维素酶中的应用；所述TrMAK基因编码如下（a）或（b）所述的TrMAK蛋白：
（a）由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；
（b）将序列1的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与木霉中的纤维素酶合成相关的由序列1衍生的蛋白质。
10.TrMAK蛋白在调节木霉中的纤维素酶合成中的应用；所述TrMAK蛋白是如下（a）或（b）：
（a）由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；
（b）将序列1的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与木霉中的纤维素酶合成相关的由序列1衍生的蛋白质。
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