[发明专利]一种雷公藤有效成分的制备方法

权利要求书

1.一种以雷公藤根为原料提取得到雷公藤有效成分的新方法，其特征在于，以干燥的雷公藤根为原料，经过刨片并粉碎、溶剂提取，提取液浓缩得到雷公藤浸膏。该浸膏经过部位分离富集，得到富含雷公藤活性物质的有效部位。该有效部位经过高速逆流色谱分离得到高纯度的雷公藤红素，经过硅胶柱层析分离得到雷公藤甲素(又名雷公藤内酯醇)，操作步骤如下：

(1)将雷公藤材料刨片并粉碎为0.5-1.5mm碎粒。然后用溶剂热回流提取，选用溶剂为95％乙醇。重复提取3次，每次3小时，滤液减压浓缩，得到浸膏A；

(2)将上述制得的浸膏溶于聚合物-无机盐水溶液-乙醇双水相体系进行分配，然后用石油醚(沸程60-90℃，下同)萃取，分出石油醚溶液。余下双水相体系再用萃取剂萃取，萃取液合并、浓缩得浸膏B。

(3)将(2)所得的浸膏溶于乙醇中，加水后静置结晶，过滤得到滤液，浓缩得到浸膏C。

(4)将(3)所得浸膏C用溶剂溶解成5％溶液，经高速逆流色谱分离得到高纯度的雷公藤红素。将(3)所得浸膏C经硅胶柱层析分离得到高纯度雷公藤甲素。

2.根据权利要求1所叙的雷公藤中有效成分分离工艺，其特征在于所述步骤(2)中，所用聚合物为聚乙二醇-20000(PEG-20000)，无机盐为硫酸铵。(2)所述的双水相体系，其特征在于由含1％PEG-20000，10％硫酸铵的水溶液与乙醇形成等体积的两相体系。

3.根据权利要求1所叙的雷公藤中有效成分分离工艺，其特征在于所述步骤(2)中，萃取剂由20％体积的乙酸乙酯和80％体积的石油醚组成。

4.根据权利要求1所叙的雷公藤中有效成分分离工艺，其特征在于所叙步骤(3)中，所得的浸膏溶于8倍质量的95％乙醇中，先加入1/2倍浸膏质量的水，静置沉淀，过滤得滤液。在所得滤液中加入1/2倍浸膏的水，静置沉淀，过滤得滤液，滤液浓缩得固体物。上述固体物再用95％乙醇溶解，过滤除去不容物，滤液浓缩得浸膏。

5.根据权利要求1所叙的雷公藤中有效成分分离工艺，雷公藤红素的分离方法，其特征在于所叙步骤(4)中的高速逆流色谱，所用的固定相和流动相由以下溶剂组成--正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水以此按体积比为1～4∶2～5∶2～5∶1～4的比例充分混合，静置分为两相。轻相为固定相，重相为流动相。色谱条件为：25℃下主机转速800转/分。紫外检测器检测波长λ＝425nm。组分峰对应流出液经过浓缩，得到雷公藤红素。

6.根据权利要求1所叙的雷公藤中有效成分分离工艺，雷公藤甲素的分离方法，其特征在于所叙步骤(4)中的硅胶柱层析，经活化(110℃40分钟)的硅胶减压下装填至体积不变，得到干装柱(硅胶高度30～60cm)。浸膏溶解在无水乙醇中成浓度为约5％溶液，加硅胶充分吸附后，去掉溶剂，得到吸样硅胶。以上所用硅胶为300～400目规格。减压下把吸样硅胶加到干装硅胶柱上。减压下加入由乙酸乙酯和石油醚按体积比为1∶9～3∶7组成的洗脱液，直至溶液达到层析住出口，然后停止减压，常压下继续用由乙酸乙酯和石油醚按体积比为1∶9～3∶7组成的洗脱液洗去雷公藤甲素前的部位，再用由乙酸乙酯和石油醚体按积比为2∶8～5∶5组成的洗脱液洗脱，定量收集流出液。流出液用雷公藤甲素标样进行跟踪分析，合并相同组分，重结晶后得到雷公藤甲素。