[发明专利]一种藜芦生物碱的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种具有抗病毒作用的藜芦生物碱制备方法，属于有机化学领域范畴。

背景技术

藜芦(Falsehellebore Root and Rhizome)为百合科藜芦属植物藜芦的干燥根及根状茎。始载于《神农本草经》，味苦，性辛、寒，有毒。归肺，胃经。《本草纲目》载入草部，毒草类，有吐风痰，杀虫毒等功效。

藜芦中主要化学成分是生物碱，由于其生理活性强烈，其生物碱类成分与很多其他中药合用时会产生化学反应，出现意外，因此藜芦在中药中一直是以毒性很大而著称。如在《儒门事亲》的十八反歌云：“本草明言十八反，诸参辛芍叛藜芦……”。

随着现代对藜芦药理作用研究的深入，表明藜芦的生物活性主要体现在其所含生物碱对心血管系统的作用，特点为在产生明显而持久降压的同时，伴有心跳变慢等作用。研究还表明，藜芦生物碱表现出的毒性，主要是因为其作用于动物及人体运动神经、感觉神经及迷走神经的麻痹作用，引起临床上的中毒反应。

虽然藜芦在传统印象中是一种毒性较大的中药，目前较为广泛的应用于杀虫剂。其作用机理是藜芦碱经虫体表面或吸食进入消化系统，造成局部刺激，引起反射性虫体兴奋，继之抑制虫体感觉神经末梢，经传导和抑制中枢神经而致害虫死亡。此外，由于藜芦在其他很多方面具有较强的生理活性，仍然在临床上得到较为广泛的应用，尤其是目前已经发现其在抗肿瘤方面有独特的作用，藜芦已经成为目前研究的一个热点。

因此，运用现代中药分离纯化技术，将藜芦中主要活性藜芦生物碱进行分离纯化，并对其药理活性、作用机制进行深入系统的研究，将会对传统中药藜芦在应用方面起到突破和提高作用。

目前从已经公开的文献和专利中，对藜芦生物碱的分离纯化报道比较少见，而且一般都还处在粗提物的阶段或者只是对其中某一两种成分的分离纯化。此外，文献中在对藜芦进行提取过程一般采用加热回流或煎煮、浓缩等方式，使得藜芦生物碱不但含量低、杂质多，而且会产生破坏作用，产生新的副产物，从而导致深入研究的难度进一步加大。

针对以上现状，本发明通过大量的实验研究，提供了一种独特的分离纯化藜芦生物碱的方法。本方法采用冷浸提取的方法，结合藜芦生物碱的理化性质，通过多次酸化后再碱化游离的方法，对藜芦生物碱进行分离纯化，并运用了萃取、树脂分离及重结晶技术，最终得到了含量高、杂质少、副产物低的藜芦生物碱。经检测，采用本发明提供的技术手段，得到的藜芦生物碱含量达到80％～98％，本品中的藜芦生物碱是由原黎芦碱、乙酰原黎芦碱、黎芦生碱、芥芬胺、黎芦胺，红玉芥芬胺等成分组成的藜芦总生物碱。

在申请号：200510025582.X名为《藜芦生物碱在治疗肿瘤方面的应用》的发明专利中公开了藜芦生物碱在制备治疗肿瘤药物中的应用，该专利中只是请求对藜芦生物碱的应用及作用机理进行保护，而未提及藜芦生物碱的制备方法。藜芦生物碱在抗肿瘤方面的应用研究在相关文献方面报道已经很多，因此申请其应用保护显然不合理。

在申请号为200910052376.6名为《高纯度藜芦胺和介芬胺的制备方法》的专利中，提供了一种高纯度藜芦胺(VERATRAMINE)和介芬胺(JERVINE)的制备方法。该方法将藜芦药材原料粉碎、乙醇回流提取、大孔吸附树脂富集、层析柱精制等步骤，最终制成高纯度的藜芦胺和介芬胺。本专利内容是针对藜芦中诸多生物碱中的两种进行分离纯化，虽然该专利中没有明确指出最终产品的得率，由于在制备过程中多次使用了加热提取和浓缩等步骤，其得率也必将很低。此外其专利申请保护的目标产物与本发明的目标产物也有本质的不同。

在申请号为201110363836.4名为《高纯度甾体生物碱计明胺的制备方法》中，公开了一种藜芦生物碱计明胺的制备方法。该方法采用了水解法经过一系列工艺制备计明胺生物碱，其制备工艺中不但采用了加热回流提取的方式，而且使用了乙醚、氯仿等易爆、毒性溶剂，在实际生产中有很大风险和危害，此外其申请保护的目标产物与本发明专利目标产物也有本质不同。

综上，本发明提供的制备工艺生产出的藜芦生物碱具有保留了藜芦本身生物碱多样性的特征，制备过程中最大程度避免了活性成分的破坏和损失，所以具有得率高、生产成本低等优势。

发明内容

本发明提供了一种制备藜芦生物碱的方法。

本发明的目的是根据藜芦生物碱的理化性质，采用酸性溶剂洗脱提取、碱性条件下萃取，再对藜芦生物碱进行充分富集，最后结合运用离子交换的原理，生产出高含量、低杂质的藜芦生物碱。

根据本发明的比较优选的实施方案，制备藜芦生物碱方法包括如下步骤：