[发明专利]基于磷光发光技术的免疫荧光试纸条及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种基于磷光发光技术的免疫荧光试纸条，其特征在于，包括：样品垫、结合物垫、分析膜、检测线、质控线、吸水垫和衬垫，所述衬垫的一面涂覆有胶水或粘附双面胶，所述样品垫、结合物垫、分析膜和吸水垫依次粘附在涂覆有胶水或粘附双面胶的衬垫上，分析膜上面设有检测线和质控线。

2.根据权利要求1所述的试纸条，其特征在于，所述样品垫和结合物垫之间设有重叠区域，二者重叠1～2mm，重叠处样品垫在上，结合物垫在下。

3.根据权利要求1所述的试纸条，其特征在于，所述结合物垫和分析膜之间设有重叠区域，二者重叠1～2mm，重叠处结合物垫在上，分析膜在下。

4.根据权利要求1所述的试纸条，其特征在于，所述分析膜和吸水垫之间设有重叠区域，二者重叠1～2mm，重叠处吸水垫在上，分析膜在下。

5.根据权利要求1所述的试纸条，其特征在于，所述检测线与质控线间隔5mm。

6.一种权利要求1所述试纸条的制备方法，其特征在于，

①磷光材料标记物的制备：

将生物活性分子分别用缓冲液稀释，分别加入磷光材料溶解液，搅匀，室温反应至少1小时，用规格型号为G25的凝胶柱过柱分离纯化，收集标记物，用磷酸盐缓冲液稀释混匀后保存；

②样品垫的制备：

用纤维素膜作为样品垫固相材料，裁切成条状，用0.01％～0.5％聚乙二醇、1％～5％牛血清白蛋白、0.01％～0.05％表面活性剂的0.01～0.3M磷酸盐缓冲液浸泡，缓冲液PH值为7.2～7.6，浸泡处理后，将样品垫放入真空干燥箱内干燥后取出，真空密封备用；

③结合物垫的制备：

用玻璃纤维素膜作为结合物垫固相材料，裁切成条状，用含1％～5％牛血清白蛋白、0.1～2％聚乙二醇、0.5～2％蔗糖、0.01％～0.1％表面活性剂的0.01～0.1M pH7.2磷酸盐缓冲液稀释磷光材料标记物，制成悬液，用喷膜机喷涂在玻璃纤维素膜上，将结合物垫放入真空干燥箱内干燥后取出，真空密封备用；

④分析膜的制备：

用缓冲液稀释检测线和质控线所使用的抗体至适合浓度，采用喷膜机分别喷涂在分析膜的检测线和质控线位置上，将喷膜后的分析膜放入真空干燥箱内，干燥后取出真空密封备用；

⑤吸水垫的制备：

选用1mm厚的滤纸作为吸水垫固相材料，将其裁切成25mmX300mm的条带，吸水垫在干燥环境保存备用；

⑥成品试纸条的制备：

按照反应顺序，先将分析膜粘附在衬垫中间位置上，在分析膜上端粘附吸水垫，吸水垫在分析膜上方，二者重叠1～2mm；在分析膜下端粘附结合物垫，结合物垫在分析膜上方，二者重叠1～2mm；再在结合物垫下端粘贴样品垫，样品垫在结合物垫上方，二者重叠1～2mm；将衬垫以及上面粘贴的样品垫、结合物垫、分析膜和吸水垫一同裁切成细条，即成一种基于磷光发光技术的免疫荧光试纸条。

7.根据权利要求6所述的试纸条的制备方法，其特征在于，所述生物活性分子为抗HBs单克隆抗体B、羊抗兔IgG抗体、HIV抗原B、兔抗吗啡单克隆抗体B、鼠抗人IgG抗体或基因工程重组戊肝抗原。

8.根据权利要求6所述的试纸条的制备方法，其特征在于，所述衬垫由聚对苯二甲酸乙二醇酯材料制成。

9.根据权利要求6所述的试纸条的制备方法，其特征在于，所述磷光材料为金属卟啉系列荧光染料，所述金属卟啉为铂/钯卟啉，所述金属卟啉的激发光光谱范围为390-420nm，发射光波长范围为600-700nm。

10.一种权利要求6所述制备方法制备的免疫荧光试纸条在检测生物样品中的应用，其特征在于，检测对象为全血、血浆、血清、脑脊液、尿液、唾液、粪便以及前列腺液标本中抗原、抗体、药物、激素、毒品、抗生素、肿瘤标志物目标待测物，以及蔬菜、水果、食品、水源中农药、抗生素的残留检测。