[发明专利]一种从贻贝中提取牛磺酸的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种提取牛磺酸的方法，尤其是涉及一种从贻贝中提取牛磺酸的方法。          

背景技术

牛磺酸又名牛胆酸、牛胆素，化学名称为2-氨基乙磺酸，是一种含硫非蛋白氨基酸，是人体中必须的氨基酸之一，也是名贵中药“牛黄”的中药成分之一，具有独特的药理及营养保健作用。它能增加细胞抗氧化、抗自由基损伤及抗病毒侵害的能力，具有增强视力、促进大脑发育、解除疲劳、降低胆固醇、抑制胆结石、消炎、镇痛的作用，因此牛磺酸被广泛应用于医药、食品添加剂等领域。

牛磺酸的生产主要有二种方法：化学合成法和天然提取法。目前应用最广泛的是化学合成法，但是化学合成法的原料和生产过程中都接触到了有剧毒的物质，而且化学合成法的工艺操作复杂，生产设备投资高，还会造成一定的环境污染，随着人民生活水平的提高和绿色化学的发展，化学合成法制备牛磺酸存在较大的局限性，而天然提取法是以牛磺酸含量较高的生物为原料，经提取、分离而得到牛磺酸，该生产方法工艺安全，无污染，使用安全性好，因此人们越来越提倡使用天然提取的牛磺酸。

牛磺酸以游离形式广泛存在于海产品及哺乳动物的几乎所有脏器中，在海洋动物体内的含量十分丰富，尤其以贝类、甲壳类动物中的牛磺酸含量最多，中国是世界上最大的贝类养殖国家，贝类资源丰富，尤其是贻贝，养殖产量巨大，来源广泛，价格便宜，因此从贻贝中提取牛磺酸的工艺优于从其他贝类中的提取，具有较好的开发前景。

授权公告号CN100554432C的中国专利公开了一种从牡蛎中提取天然牛磺酸的方法，该方法依次设置了制备浆液、超声波-酶解破碎、灭酶过滤、浓缩、二级分离、活性炭处理、树脂吸附纯化、沉淀和结晶和干燥步骤。其不足之处是在于，在牛磺酸的提取过程中采用超声波-酶解破碎，而酶的成本昂贵，使得牛磺酸的提取成本较高，另外该方法中通过加入三氯乙酸及CTAB来进行二次沉淀除杂，采用单纯的采用化学沉淀除杂效果并不理想，另外该方法中直接用通过树脂吸附纯化后得到牛磺酸溶液进行结晶干燥，未进行选择性收集，使最后得到的牛磺酸纯度不高。

 

发明内容

本发明的目的在于解决现有的牛磺酸提取方法提取成本高，得到的牛磺酸纯度低的问题，提供一种提取率与纯度高，提取工艺简单，提取成本低的从贻贝中提取牛磺酸的方法。     

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种从贻贝中提取牛磺酸的方法，所述的方法包括以下步骤：

（1）匀浆：将贻贝肉洗净后称量，捣成浆状后加入蒸馏水，搅拌均匀后得到匀浆液，其中，贻贝肉与蒸馏水的质量比为1:3~6。新鲜贻贝肉与蒸馏水的质量比为1:3~6，具有较高的提取率。

（2）超声波破碎：将匀浆液在40~50℃的恒温条件下，用功率为400~450W的超声波处理30~60min，得破碎液。由于牛磺酸是以游离形式存在于贻贝肉的细胞内，利用超声波的物理能量作用，可促使细胞膜破碎，使牛磺酸从细胞内快速且充分释放出来，大大缩短了提取牛磺酸的时间，在提高生产效率的同时还提高了牛磺酸的提取率。

（3）提取：将破碎液在沸水浴中加热煮沸1~2h，用纱布过滤破碎液得到提取液和滤渣。用纱布过滤以除去残渣。

（4）二次分离：在提取液中加入质量百分数为10%的磺基水杨酸，磺基水杨酸与提取液的质量比为1:5~10，对提取液进行离心分离后得到上清液，再对上清液用分子截留量为1000Da的超滤膜进行超滤，得到滤液。先采用磺基水杨酸进行化学沉淀除杂，再选用1000Da的超滤膜进行超滤进行物理过滤以进一步除杂，采用化学过程与物理过程相结合的除杂方法，能大大提高滤液的质量，而且采用超滤法进行除杂，成本更低，方法简单有效。

（5）纯化：将滤液pH调节至4~6，使其经过强酸性阳离子交换树脂柱并用蒸馏水洗脱，以10ml一组收集洗脱液，对每组洗脱液进行薄板层析，根据薄层色谱计算每组洗脱液的R_f值，并分别与牛磺酸标准品的R_f值进行比较，合并薄层色谱中显色点单一且R_f值与标准品牛磺酸一致的洗脱液。强酸性阳离子交换树脂柱分离效果好，得到的牛磺酸纯度高，而且通过对每组洗脱液进行薄板层析，再根据薄层色谱计算每组洗脱液的R_f值，并分别与牛磺酸标准品的R_f值进行比较，选择性地收集其中牛磺酸纯度较高的洗脱液，以进一步提高最后制得的牛磺酸的纯度。

（6）浓缩：将合并的洗脱液浓缩至原体积的1/5~1/3，得到浓缩液。