[发明专利]禽肺病毒通用型RT-PCR检测引物及检测方法有效
| 申请号： | 201210190445.1 | 申请日： | 2012-06-11 |
| 公开（公告）号： | CN102676701A | 公开（公告）日： | 2012-09-19 |
| 发明（设计）人： | 孙石开;宋永峰;鲁俊鹏;刘闯;覃健萍;陈峰;张祥斌;邝春明 | 申请（专利权）人： | 广东温氏食品集团有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 广州市深研专利事务所 44229 | 代理人： | 陈雅平 |
| 地址： | 527439 *** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 肺病 通用型 rt pcr 检测 引物 方法 | ||
【权利要求书】：
1.禽肺病毒通用型RT-PCR检测引物，其特征在于核苷酸序列如SEQ ID NO:1~2所示。
2.一种禽肺病毒检测方法，其特征在于用权利要求1所述禽肺病毒通用型RT-PCR检测引物和待检样品RNA进行RT-PCR，如果PCR产物片段大小为319bp或320bp，则待检样品中有禽肺病毒。
3.根据权利要求2所述禽肺病毒检测方法，其特征在于RT-PCR的反应体系含有一步法PCR混合酶、缓冲液、SEQ ID NO:1~2所示引物、样品RNA和无RNA酶的水。
4.根据权利要求2所述禽肺病毒检测方法，其特征在于RT-PCR的反应程序为：
（1）50℃ 30min；
（2）预变性：95℃ 4min；
（3）变性：94℃ 30sec；退火：55~58℃ 20sec；延伸：72℃ 1 min；共进行30个循环；
（4）延伸：72℃10min。
5.根据权利要求4所述禽肺病毒检测方法，其特征在于步骤（3）退火温度为57℃。
6.根据权利要求2所述禽肺病毒检测方法，其特征在于RT-PCR扩增产物序列为SEQ ID NO:3~6中的任意一条时，说明待检样品中有禽肺病毒。
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