[发明专利]一种凝结芽孢杆菌及其在混合发酵产L-乳酸中的应用

权利要求书

1.一种凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)BC-N6242，已保藏于中国典型培养物保藏中心CCTCC，保藏编号：CCTCC M 2012156。

2.权利要求1所述的凝结芽孢杆菌BC-N6242与干酪乳杆菌LC-N235在混合发酵产L-乳酸中的应用。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于包含如下步骤：

1)、平板培养：将凝结芽孢杆菌BC-N6242和干酪乳杆菌LC-N235分别接种至平板基本培养基上培养，培养温度为40~45℃，培养时间为2~3 d；

2)、斜面培养：将步骤1)平板培养的两种菌分别接种至斜面培养基培养，培养温度为40~45℃，培养时间1~2 d；

3)、种子培养：将步骤2)中的两种菌的斜面培养物分别接种至种子培养基中培养，培养温度为35~45℃，250ml摇瓶装液量10~30ml，培养时间12~20h；

4)、混合发酵：将步骤3)中的两种菌的种子培养液按凝结芽孢菌BC-N6242∶干酪乳杆LC-N235=(0.5~2):1的比例接种至发酵培养基中，接种量5~15%(v/v)，250ml摇瓶装液量20~50ml，发酵温度35~45℃，发酵培养30~50 h。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于所述步骤(1)平板基本培养基包含如下质量百分数的组分：碳源4%~6%、氮源1.0%~2.0%、无机盐0.02%~0.08%、中和剂2%~4%，琼脂1.0%~1.5%、其余为水，pH 7.0~7.4；其中所述碳源为葡萄糖和淀粉中的一种或两种的混合；所述氮源为蛋白胨、牛肉膏、酵母膏中的一种或几种的混合；所述无机盐为钠盐、钾盐、镁盐和磷酸盐中的一种或几种的混合；所述中和剂为重质碳酸钙。

5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于所述斜面培养基包含如下质量百分数的组分：碳源0.3%~0.6%、氮源1.0%~2.0%、无机盐0.02%~0.08%、中和剂0.2%~0.4%、琼脂1.0%~1.5%、其余为水，pH 7.0~7.4；其中所述碳源为葡萄糖和淀粉中的一种或两种的混合；所述氮源为蛋白胨、牛肉膏、酵母膏中的一种或几种的混合；所述无机盐为钠盐、钾盐、镁盐和磷酸盐中的一种或几种的混合；所述中和剂为重质碳酸钙。

6.根据权利要求3所述的应用，其特征在于所述种子培养基包含如下质量百分数的组分：碳源4%~8%、氮源1%~5%、无机盐0.02%~0.08%，中和剂 2%~4%，其余为水，pH 7.0~7.4；其中所述碳源为葡萄糖和淀粉中的一种或两种的混合；所述氮源为蛋白胨、牛肉膏、酵母膏中的一种或几种的混合；所述无机盐为钠盐、钾盐、镁盐、磷酸盐中的一种或几种的混合；所述中和剂为重质碳酸钙。

7.根据权利要求3所述的应用，其特征在于所述发酵培养基包含如下质量百分数的组分：碳源10%~20%、氮源1.0%~3.0%、无机盐0.02%~0.08%、中和剂 5.0%~10.0%，其余为水，pH 7.0~7.4；其中所述碳源为葡萄糖、玉米粉糖化液、大米糖化液、蔗糖中的一种或多种的混合；所述氮源为蛋白胨、牛肉膏、酵母膏中的一种或多种的混合；所述无机盐为钠盐、钾盐、镁盐和磷酸盐中的一种或几种的混合；所述中和剂为重质碳酸钙。