[发明专利]菊花水孔蛋白编码基因CmAQP 及其植物表达载体和构建方法有效
申请号: | 201210171527.1 | 申请日: | 2012-05-29 |
公开(公告)号: | CN102660557A | 公开(公告)日: | 2012-09-12 |
发明(设计)人: | 陈素梅;王红宾;陈发棣;蒋甲福;李佩玲;刘浦生;管志勇;房伟民;滕年军;刘兆磊 | 申请(专利权)人: | 南京农业大学 |
主分类号: | C12N15/29 | 分类号: | C12N15/29;C12N15/82;C12N15/66;A01H5/00 |
代理公司: | 南京天华专利代理有限责任公司 32218 | 代理人: | 徐冬涛;傅婷婷 |
地址: | 210095 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 菊花 水孔 蛋白 编码 基因 cmaqp 及其 植物 表达 载体 构建 方法 | ||
1.菊花‘神马’抗逆基因CmAQP,其特征在于该基因的序列为SEQ ID NO.1。
2.菊花‘神马’抗逆基因CmAQP植物表达载体,其特征在于由权利要求1所述的菊花‘神马’抗逆基因CmAQP与植物表达载体构成。
3.根据权利要求2所述的菊花‘神马’抗逆基因CmAQP植物表达载体,其特征在于所述的植物表达载体为BamH Ⅰ和Xba Ⅰ双酶切CmAQP后插入到表达载体pCAMBIA 1301质粒进行重组反应得到。
4.权利要求3所述的菊花‘神马’抗逆基因CmAQP植物表达载体的构建方法,其特征在于包括如下步骤:
设计引物以菊花‘神马’cDNA为模板,用高保真酶进行PCR反应,在CmAQP基因的上游和下游分别引入BamH I和Xba I酶切位点,
上游引物CmAQP-TF:SEQ ID NO.2
下游引物CmAQP-TR:SEQ ID NO.3
PCR产物连接到pMD19-T Simple载体,转化TOP10感受态细胞,提取阳性质粒,BamH I和Xba I双酶切的CmAQP片段与BamH I和Xba I双酶切的pCAMBIA 1301连接转化,提取阳性质粒,酶切电泳检测并测序验证,植物表达载体pCAMBIA 1301-CmAQP构建成功。
5.权利要求1所述的菊花‘神马’抗逆基因CmAQP在创制耐盐新种质和/或植物品种改良中的应用。
6.权利要求2所述的菊花‘神马’抗逆基因CmAQP植物表达载体在创制耐盐新种质和/或植物品种改良中的应用。
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