[发明专利]一种缩短烟叶发酵周期的微生物制剂及其应用

权利要求书

1.一种缩短烟叶发酵周期的微生物制剂，其特征在于，主要由蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus与解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliqyefaciens构成，其活菌数比例为10～200:1～50；该微生物制剂所包含的微生物均分离自烟叶表面，经中国普通微生物保藏管理中心鉴定，分别属于蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus，保藏号为CGMCC No.3864和解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliqyefaciens,保藏号为CGMCC No.3866。

2.根据权利要求1所述的一种缩短烟叶发酵周期的微生物制剂，特征在于，所述的蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus与解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliqyefaciens是通过如下方法制备：将剪碎的烟叶表面加入已灭菌的LB培养液中，于37℃摇床培养24小时后，用无菌吸管吸取培养液，采用稀释涂布法在灭菌固体LB培养基上进行平板涂布，待菌长出后，用接种针在另一灭菌固体LB培养基上进行划线法分离，经纯化培养后得该单菌落纯培养菌。

3.根据权利要求2所述的一种缩短烟叶发酵周期的微生物制剂的制备，其特征在于，将上述单菌落纯培养菌经过试管培养基、扩大培养基、液体发酵培养基培养后，分别获得蜡状芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌菌液。

4.根据权利要求3所述的一种缩短烟叶发酵周期的微生物制剂的制备，其特征在于，将上述蜡状芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌菌液分别直接离心后得到菌泥，按照活菌数比例10～200:1～50进行混合，按重量百分比加入海藻糖1～2%、甘油1～2.8%、谷氨酸钠0.5～1.5%作为该菌泥的复合冻干保护剂进行冷冻干燥得到粉末状微生物制剂。

5.根据权利要求4所述的一种缩短烟叶发酵周期的微生物制剂的应用，其特征在于，将上述粉末状微生物制剂按照0.5～5%的比例溶于无菌水中，制成微生物制水剂，将该水剂以3～10%的比例均匀喷施到烟叶上，将烟叶于25℃～50℃，65% RH～80% RH下人工发酵10～40天，可获得与自然醇化烟叶品质无明显差异的人工发酵后烟叶。

6.根据权利要求4所述的一种缩短烟叶发酵周期的微生物制剂的应用，其特征在于，将该微生物制剂用于烟叶发酵过程，具有改善烟叶品质、缩短烟叶发酵周期的作用。