[发明专利]一种清毒安肾胶囊的质量控制方法及应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种清毒安肾胶囊的质量控制方法及应用，具体是一种通过构建指纹图谱的清毒安肾胶囊的质量控制方法及应用，属于药物分析技术领域。

背景技术

中药复方是中医用药的主流，其特征包括：组成复方的药味具有一定的主次关系；复方内部的不同药味组合间的有机配合关系形成了复方整体综合的治疗特征。长久以来复方的物质基础基本处于一种模糊的状态；复方的质量优劣难以以明确的指标进行评价；复方的质量不稳定，直接引起了治疗效果的不稳定。中药指纹图谱的研究和建立正是为了解决中药质量控制和监督这一关键问题而采取的一种方法，它从药材的生产、加工、贮存及制剂的原料、中间品、成品等各个角度和方面，进行中药样品分析，通过相似性和相关性对比，发现质量变异和缺陷，从而全面、特异地把握住中药制剂的质量命脉。

清毒安肾胶囊是中药复方制剂，由黄芪、淫羊藿、大黄(酒制)、当归、川芎、白芍、地黄、三七、茯苓、泽泻十味药材组成，诸药合用，起健脾益肾、通腑降浊、活血化瘀功效，用于治疗慢性肾功能衰竭、肾功能不全代偿期、氮质血症期和尿毒症早期。其处方专利已获国家知识产权局授权，专利号为：20031011934.2。原质量标准【鉴别】项下采用薄层色谱法对处方中的黄芪、淫羊藿、白芍、大黄、当归、川芎、三七7味药材进行鉴别，【含量测定】项下采用高效液相色谱法分别测定君药淫羊藿中淫羊藿苷以及佐药白芍中芍药苷的含量，其不足之处在于：

1、【鉴别】项使用了6个薄层色谱鉴别，【含量测定】项使用了2种液相色谱条件分别测定淫羊藿中淫羊藿苷以及白芍中芍药苷的含量，操作繁琐，未测君药黄芪的含量。

2、复方制剂是多味中药联用，现行的单一测定方法给出信息少，无法全面、准确地评价中药制剂质量。

发明内容

本发明的目的是克服上述现有技术中的不足之处，通过对清毒安肾胶囊HPLC指纹图谱的研究，提供一种有效可靠的清毒安肾胶囊的质量控制方法及应用。

本发明采用HPLC非线性洗脱在一个流动相系统利用不同检测波长，同时检出复方中的八味药材成分，建立的指纹图谱可以全面监控原料药材、半成品和成品的质量，通过色谱指纹特征相似程度的比较，评价优劣、考察稳定性和一致性，弥补了原质量控制方法的不足。

本发明通过以下技术方案实现上述目的，一种清毒安肾胶囊的质量控制方法，包括以下步骤：

(1)供试品溶液的制备：精密称取清毒安肾胶囊0.1g～10.0g，用甲醇提取，滤过，取滤液适量，净化，用甲醇配成清毒安肾胶囊供试品溶液；

(2)对照品溶液的制备：精密称取毛蕊异黄酮苷、淫羊藿苷、大黄酚、阿魏酸、芍药苷、人参皂苷Rg₁适量，加甲醇使溶解，制成混合对照品溶液：毛蕊异黄酮苷、淫羊藿苷、大黄酚、阿魏酸、芍药苷的浓度为0.1mg/ml，人参皂苷Rg₁的浓度为0.2mg/ml。

(3)采用高效液相色谱法分析上述供试品溶液和对照品溶液，色谱条件为：进样量10～30μ1；色谱柱为ODS C₁₈，3μm；流动相为用磷酸或甲酸或冰醋酸调至pH为2.4的水-乙腈，梯度洗脱；柱温：30℃；检测波长：203nm、260nm；得到清毒安肾胶囊高效液相色谱指纹图谱；

所述梯度洗脱步骤为：0～10分钟，流动相乙腈∶水由2∶98渐变为18∶82；10～20分钟，流动相乙腈∶水为18∶82；20～55分钟，流动相乙腈∶水由18∶82渐变为30∶70；55～90分钟，流动相乙腈∶水由30∶70渐变为88∶12。

上述质量控制方法步骤(1)所述制备清毒安肾胶囊供试品溶液是：取清毒安肾胶囊内容物适量，甲醇提取，滤过，定量转移到固相萃取柱，用甲醇分次洗脱固相萃取柱，收集洗脱液，回收甲醇，残渣再用甲醇溶解，制成供试品溶液。更具体地，该步骤为：

取本品内容物适量，混匀，研细，取约0.8g，置具塞锥形瓶中，精密称定，精密加入甲醇50ml，密塞，称定重量，超声处理(功率250W，频率40kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml，定量转移至固相萃取小柱(填料：C₁₈，规格：6ml，500mg)，用甲醇20ml分次洗脱，收集洗脱液，减压回收溶剂至干，残渣定量加入甲醇2ml，使完全溶解，用0.22μm微孔滤膜滤过，作为成品供试品溶液。

所述梯度洗脱的步骤也可用表1表示：

表1梯度洗脱表