[发明专利]一种用于重组鸡干扰素α的补料培养基及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物发酵领域，尤其是一种用于重组鸡干扰素α的补料培养基及其制备方法。

背景技术

干扰素是一类在同种细胞上具有抗病毒活性的糖蛋白，通过抑制病毒DNA和RNA的复制达到预防和治疗效果，是脊椎动物抵抗病毒、细菌、寄生虫感染及肿瘤侵袭的重要组分。同时干扰素还具有神经、免疫、内分泌调节等多种生物学功能。1957年自Isaacs和Lindenmann发现干扰素以来，干扰素已经显示出了极强的抗病毒、免疫调节活性和广阔的应用前景。因而，干扰素的研究越来越受到人们的广泛关注。与传统的宠物保健治疗药物相比，干扰素在治疗效果及使用时机方面显示出了极大的优越性。

目前，干扰素等蛋白类药物的工业生产中使用最多的工程菌为大肠杆菌，采用高密度培养技术来提高菌体的发酵密度，从而最终提高产物的比生产率。高密度发酵目的的实现，除了重组菌本身的表达性质之外，还必须有重组菌生长和产物表达的最适培养基组成等条件。目前生产重组鸡α干扰素的补料培养基中大多有葡萄糖为碳源，在培养前期过程中就极易产生乙酸，造成重组菌生长和表达的抑制效应。因此，选择合适的发酵培养基不仅可以减少培养体积，强化下游分离提取，而且可以缩短生产周期、减少设备投资从而降低生产成本，能极大地提高在市场上得竞争力。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于提供一种用于重组鸡干扰素α的补料培养基。

本发明所要解决的另一技术问题在于提供上述用于重组鸡干扰素α的补料培养基的制备方法。

为解决上述技术问题，本发明的技术方案是：

一种用于重组鸡干扰素α的补料培养基，主要由葡萄糖、蛋白胨、酵母粉、MgSO₄·7H₂O、NaCl和H₂O组成，其中每1L H₂O中含有葡萄糖120～260g、蛋白胨30～60g、酵母粉15～35g、MgSO₄·7H₂O 2～6g、NaCl 3～7g。

优选的，上述用于重组鸡干扰素α的补料培养基，其中每1L H₂O中含有葡萄糖130～220g、蛋白胨45～60g、酵母粉20～35g、MgSO₄·7H₂O 3～6g、NaCl 3～5g。

优选的，上述用于重组鸡干扰素α的补料培养基，其中每1L H₂O中含有葡萄糖200g、蛋白胨60g、酵母粉35g、MgSO₄·7H₂O 6g、NaCl 3g。

优选的，上述用于重组鸡干扰素α的补料培养基，其中每1L H₂O中含有葡萄糖220g、蛋白胨60g、酵母粉20g、MgSO₄·7H₂O 3g、NaCl 4g。

优选的，上述用于重组鸡干扰素α的补料培养基，其中每1L H₂O中含有葡萄糖260g、蛋白胨30g、酵母粉15g、MgSO₄·7H₂O 6g、NaCl 7g。

上述用于重组鸡干扰素α的补料培养基的制备方法，具体制备步骤如下：

(1)按上述各组分的配比精确称取规定重量的组分；

(2)在蒸馏水溶液中溶解；

(3)用50％氨水溶液调节pH值至6.8～7.4；

(4)装入补料瓶中在115℃，20分钟条件下灭菌，即得。

本发明的有益效果是：

上述用于重组鸡干扰素α的补料培养基，在重组大肠杆菌发酵过程中避免或减少了乙酸的生成，减轻了传统工艺发酵过程中对菌体生长及蛋白表达的抑制作用，实现了重组大肠杆菌的高密度生长，提高了重组鸡α干扰素蛋白的产率，从而有效降低了生产成本；其制备方法简单，适合规模化工业生产的需要。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明所述技术方案作进一步的说明。

下述实施例中采用的补料瓶是四川蜀牛公司生产的；所采用的试剂均为普通化学试剂公司购买；目的蛋白测定采用SDS-PAGE法，采用BIO-RAD公司的蛋白电泳仪。

实施例1