[发明专利]一种枣任碱的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于中药有效部位的提取分离技术领域，具体地说，涉及一种从柳叶木兰中提取制备枣任碱的方法。

背景技术

枣任碱为异喹啉生物碱，mp264～268℃(分解)(甲醇-二氯甲烷)，无光学活性。分子式：C₁₇H₁₅NO₃，分子量：281.31，分子结构式：

。

枣任碱具有神经肌肉阻断作用。对青蛙由直接或间接刺激产生的肌肉收缩有阻断作用，其有效剂量为271μM(86μg/mL）。

柳叶木兰（学名：Magnolia salicifolia）属于木兰科木兰属，是日本的特有植物，人工栽培较少见。其叶含生物碱、酚类和挥发油(主要成分为芳樟醇、甲基丁香油酚、苯乙醇等)；根和茎皮含黄心树宁碱、氧化黄心素宁碱、柳叶木兰碱和枣任碱等；其花性温，味苦辛，有止咳、化浊之功效，且香味浓烈，是熏制茶叶和提炼香料的重要原料。

发明内容

本发明针对柳叶木兰提取枣任碱时，采用大孔树脂制备枣任碱，具体内容如下：

1).酸水提取：以富含枣任碱的柳叶木兰为原料，粉碎成粗粉，用体积含量为0.2-1%的盐酸水溶液浸泡8-12小时，渗漉提取1-3次；

2).大孔树脂富集：提取液调pH至7.5-9，过大孔吸附树脂柱，先以水洗，再用50-70%乙醇洗脱，浓缩洗脱液；

3).溶剂萃取：采用2-5倍浓缩液体积的二氯甲烷或氯仿萃取，萃取2-4次，合并萃取液，浓缩得浸膏；

4).色谱柱层析：用氧化铝或硅胶作为柱填料，粒度为100-300目，二氯甲烷-甲醇梯度洗脱，分段收集流分，浓缩干燥得到纯度达95%以上的枣任碱产品。

步骤2）所述大孔吸附树脂可选DA201、DM301、AB-8型大孔吸附树脂。

步骤4）所述二氯甲烷-甲醇混合溶剂，按体积比，由高到低，依次按50:1、20:1、10:1、5:1和1:1梯度洗脱。

本发明采用大孔树脂和氧化铝/硅胶应用于枣任碱的制备，大大缩短了提取制备时间、去除了杂质，避免酸碱反复使用，尤其是浓酸浓碱的使用，具有简便快速、易于洗脱和再生、产品纯度高等优点，适于枣任碱的大量制备。

具体实施方式

实施例1：

柳叶木兰原料粉碎成粗粉，取1kg，用体积含量为1%的盐酸水溶液浸泡8小时后，进行渗漉提取3次，渗漉液调pH至7.5，过DM301型大孔吸附树脂柱，先以水洗除杂，再用70%乙醇洗脱，收集洗脱液浓缩，向浓缩液中加入5倍体积的二氯甲烷萃取，反复萃取2次，合并萃取液，浓缩得浸膏，与适量氧化铝硅胶（100目）拌样上柱，用二氯甲烷-甲醇按50:1、20:1、10:1、5:1和1:1梯度洗脱，分段收集流分，浓缩干燥得到纯度达95%以上的枣任碱产品8.0mg。

实施例2：

柳叶木兰原料粉碎成粗粉，取1kg，用体积含量为0.2%的盐酸水溶液浸泡12小时，渗漉提取1次，渗漉液调pH至9，过AB-8型大孔吸附树脂柱，先以水洗除杂，再用50%乙醇洗脱，收集洗脱液浓缩，向浓缩液中加入2倍体积的氯仿萃取，反复萃取4次，合并萃取液，浓缩得浸膏，与适量氧化铝硅胶（300目）拌样上柱，用二氯甲烷-甲醇按50:1、20:1、10:1、5:1和1:1梯度洗脱，分段收集流分，浓缩干燥得到纯度达95%以上的枣任碱产品7.1mg。

实施例3：

柳叶木兰原料粉碎成粗粉，取10kg，用体积含量为0.5%的盐酸水溶液浸泡10小时，渗漉提取2次，渗漉液调pH至8，过DA201型大孔吸附树脂柱，先以水洗除杂，再用60%乙醇洗脱，收集洗脱液浓缩，向浓缩液中加入3倍体积的二氯甲烷萃取，反复萃取4次，合并萃取液，浓缩得浸膏，与适量氧化铝硅胶（200目）拌样上柱，用二氯甲烷-甲醇按50:1、20:1、10:1、5:1和1:1梯度洗脱，分段收集流分，浓缩干燥得到纯度达95%以上的枣任碱产品67.5mg。

实施例4：

柳叶木兰原料粉碎成粗粉，取10kg，用体积含量为0.8%的盐酸水溶液浸泡11小时，渗漉提取3次，渗漉液调pH至8.5，过AB-8型大孔吸附树脂柱，先以水洗除杂，再用65%乙醇洗脱，收集洗脱液浓缩，向浓缩液中加入3倍体积的二氯甲烷萃取，反复萃取4次，合并萃取液，浓缩得浸膏，与适量氧化铝硅胶（300目）拌样上柱，用二氯甲烷-甲醇按50:1、20:1、10:1、5:1和1:1梯度洗脱，分段收集流分，浓缩干燥得到纯度达95%以上的枣任碱产品54.3mg。