[发明专利]一种从三叶蜜茱萸中制备3,3’,4’,5,7-五甲氧基黄酮的方法

说明书

技术领域

本发明属于天然药物化学领域，涉及一种从三叶蜜茱萸中制备3,3’,4’,5,7-五甲氧基黄酮的方法。

背景技术

3,3’,4’,5,7-五甲氧基黄酮（3,3’,4’,5,7-Pentumethoxyflavone）为淡黄色板状结晶，分子式为C₂₀H₂₀O₇，分子量为372.37，mp.150-151℃。存在于多种植物中，如芸香科三叶蜜茱萸Melicope triphylla Merr.的叶、马鞭草科植物杜虹花Callicarpa formosana Rolfe的叶以及姜科植物琴状凹唇姜Boesenbergia pandurata(Roxb.)Schltr.的根茎中等等。三叶蜜茱萸，又名假山脚鳖，为灌木，产自台湾（恒春半岛、兰屿），菲律宾亦产，有报道从三叶蜜茱萸中分离得到多种高度氧化的黄酮类物质，但操作繁琐，不适合工业制备。3,3’,4’,5,7-五甲氧基黄酮具有广泛的生理活性。现代药理研究表明，3,3’,4’,5,7-五甲氧基黄酮具有抗肿瘤活性、抑制cAMP磷酸二酯酶活性、血管扩张作用和抗炎作用。

发明内容

本发明的目的是提供一种低成本、产品质量好的从三叶蜜茱萸中制备3,3’,4’,5,7-五甲氧基黄酮的方法。

为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种从三叶蜜茱萸中制备3,3’,4’,5,7-五甲氧基黄酮的方法，其特征在于包括以下步骤：取三叶蜜茱萸叶烘干粉碎，用石油醚脱脂，将脱脂药材用60-80%乙醇温浸12-48小时，提取1-3次，过滤，合并滤液，浓缩得浸膏，按比例加入丙酮和硫酸铵双水相系统混匀，分为上、下两相，取出富含三叶蜜茱萸黄酮的丙酮相，加水、乙酸乙酯和无机盐反萃取，将乙酸乙酯相减压浓缩，进行硅胶柱层析，二氯甲烷-丙酮重结晶得到3,3’,4’,5,7-五甲氧基黄酮。

所述丙酮和硫酸铵双水相系统中，丙酮加入量为浸膏体积量的12-25%（V/V），硫酸铵加入量为液体总体积量的15-20%（W/V）。

所述反萃取中，所述无机盐为硫酸铵、磷酸氢二钾、磷酸钾中的一种或多种复合，分相温度为20-30℃，静置时间为3-6小时。

所述硅胶柱为短粗柱，采用乙酸乙酯-丙酮混合溶液为洗脱剂，体积比为5:1-1:3，收集洗脱液，浓缩、干燥得粗晶。

本发明的有益效果是：采用双水相萃取和硅胶短粗柱层析后再重结晶，获得含量95%以上的3,3’,4’,5,7-五甲氧基黄酮结晶，成本低、分离效果好、产品质量高；本发明所用试剂均为低毒、可回收利用，大大降低了对环境的污染。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式

实施例1：

取三叶蜜茱萸叶低温烘干粉碎，称取5kg用5倍量的石油醚回流脱脂2次，每次1小时，将脱脂药材挥干残留试剂，加入75%的乙醇于50℃温浸24小时，提取2次，过滤，合并滤液，浓缩得浸膏，然后加入丙酮和硫酸铵混匀，使形成的双水相体系中丙酮的体积为浸膏量的18%，硫酸铵质量占总液体体积量的15%，于55℃水浴中振摇1小时，静置3小时分相，将富含三叶蜜茱萸黄酮的丙酮上相取出，加入乙酸乙酯、磷酸氢二钾、水，充分混匀，在25℃条件下静置5小时，取出乙酸乙酯相，减压浓缩回收试剂，加入硅胶短粗柱层析，以乙酸乙酯-丙酮为洗脱机，依次按体积比5:1、3:1、1:1、1:3进行洗脱，收集3,3’,4’,5,7-五甲氧基黄酮洗脱液，回收试剂，干燥得粗晶，再用二氯甲烷-丙酮（3:2）重结晶，滤出晶体，低温干燥即得3,3’,4’,5,7-五甲氧基黄酮312mg，纯度为97.4%。

实施例2：