[发明专利]细胞培养基及其用途

权利要求书

1.一种细胞培养基，其特征在于，包含：

基础培养基，所述基础培养基为AminomaxC-100培养基；

AmnioMaxC-100supplement；

bFGF；以及

DMOG，

任选地，所述AmnioMaxC-100supplement与所述AminomaxC-100基础培养基的体积比为1∶6，

任选地，所述bFGF的浓度为4-10ng/ml，优选5ng/ml，

任选地，所述DMOG的浓度为200-500μM，优选300μM。

2.一种用于体外培养毛乳头细胞的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中含有bFGF和DMOG，

任选地，进一步包含AmnioMaxC-100supplement，

任选地，所述bFGF、DMOG和AmnioMaxC-100supplement分别设置在不同的容器中，

任选地，进一步包含基础培养基，所述基础培养基为AminomaxC-100培养基，

任选地，所述bFGF、DMOG和AmnioMaxC-100supplement的至少之一溶解于基础培养基，

任选地，所述bFGF的浓度为4-10ng/ml，优选5ng/ml，

任选地，所述DMOG的浓度为200-500μM，优选300μM。

3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，进一步包含AmnioMaxC-100supplement，

任选地，所述AmnioMaxC-100supplement与所述AmnioMaxC-100基础培养基的体积比为1∶6。

4.一种用于体外培养毛乳头细胞的试剂盒，其特征在于，包含权利要求1所述的培养基。

5.权利要求1所述的培养基在体外培养毛乳头细胞中的用途。

6.权利要求2-4任一项所述的试剂盒在体外培养毛乳头细胞中的用途。

7.一种体外培养毛乳头细胞的方法，其特征在于，包括以下步骤：

利用权利要求1所述的培养基，培养CD133阳性毛乳头细胞，

任选地，所述CD133阳性毛乳头细胞来源于人头皮或小鼠背部皮肤组织，

任选地，所述CD133阳性毛乳头细胞是通过下列步骤获得的：

从人头皮或小鼠背部皮肤组织分离真皮细胞；

利用CD133抗体对所分离的真皮细胞进行分选，以便获得所述CD133阳性毛乳头细胞，

任选地，所述CD133抗体为APC-CD133抗体，

任选地，利用CD133抗体对所分离的真皮细胞进行分选进一步包括：

将所分离的真皮细胞悬浮于PBS中；

向所述培养基中添加APC-CD133抗体，任选地按照每100微升体系，每10⁶个细胞添加APC-CD133抗体1μg；以及

利用流式细胞仪分选CD133阳性毛乳头细胞，

任选地，于37℃、5％CO₂的培养箱中进行所述培养，

任选地，培养CD133阳性毛乳头细胞进一步包括：

每3天更换一次培养基，9-10天进行第一次传代培养，培养至第3代。

8.一种毛乳头细胞或其衍生物，其特征在于，是通过权利要求7所述的体外培养毛乳头细胞的方法获得的。

9.一种体外培养毛乳头细胞的系统，其特征在于，包括：

分离装置，所述分离装置用于从人头皮或小鼠背部皮肤组织分离真皮细胞；

分选装置，所述分选装置与所述分离装置相连，并且适于利用CD133抗体从所分离的真皮细胞中分选CD133阳性毛乳头细胞；以及

培养装置，所述培养装置与所述分选装置相连，并且设置有权利要求1所述的培养基，用于对所述CD133阳性毛乳头细胞进行培养，

任选地，所述CD133抗体为APC-CD133抗体，

任选地，所述分选装置为流式细胞仪。

10.一种鉴定制剂对毛囊组织是否具有影响的方法，其特征在于，包括以下步骤：

将权利要求8所述的毛乳头细胞或其衍生物与所述制剂接触；以及

对接触前后的毛乳头细胞或其衍生物进行检测，

其中，

基于所述毛乳头细胞或其衍生物的形态变化，以及其干细胞特性和毛囊诱导能力标志物的表达变化，判断所述制剂对毛囊组织是否具有影响。