[发明专利]一种高纯度阿扎霉素B的制备方法

权利要求书

1.一种高纯度阿扎霉素B的制备方法，其特征在于该方法包括下述步骤：

1）常温下，在发酵液中加入助滤剂搅拌30分钟-90分钟至助滤剂分散均匀，固液分离，得到阿扎霉素B菌丝体；

2）常温条件下，在阿扎霉素B菌丝体中加入70-95%的乙醇浸泡，固液分离，得到阿扎霉素B浸提液；

3）将阿扎霉素B浸提液通过大孔脱色树脂脱色，得到脱色液；

4）将阿扎霉素B脱色液用水稀释至乙醇浓度30%-40%后导入大孔吸附树脂吸附；

5）吸附完毕，使用极性溶剂与水的混合液进行梯度解吸，HPLC在线监测，收集HPLC含量大于95%的阿扎霉素B解吸液，浓缩，得解吸浓缩液；

6）解吸浓缩液萃取后，浓缩，得阿扎霉素B粗提物；

7）粗提物加入溶剂结晶，固液分离得到阿扎霉素B精粉。

2.根据权利要求1所述的方法，其中步骤1）中的助滤剂为珍珠岩或硅藻土，助滤剂的用量为每升发酵液加入助滤剂0.01-0.1千克。

3.根据权利要求1所述的方法，其中步骤2）70-95%的乙醇加入量为每千克菌丝中加入2-6升。

4.根据权利要求1 所述的方法，其中步骤3）中的大孔脱色树脂为S-8、LX-700、D290、XDA-7或D301树脂，树脂的用量为每升阿扎霉素B浸提液使用树脂0.01-0.1升，树脂柱径高比为1：3-1：5，流速为1-3倍柱体积/小时。

5.根据权利要求1所述的方法，其中步骤4）中的大孔吸附树脂为XAD-1600、HZ816、AB-8、X-5和D312树脂，树脂的用量为每升阿扎霉素B浸提液使用树脂0.01-0.1升，树脂柱径高比为1：3-1：6，流速为1-2倍柱体积/小时。

6.根据权利要求1所述的方法，其中步骤5）所述的极性溶剂为甲醇、乙醇、异丙醇中的一种。

7.根据权利要求1所述的方法，其中步骤5）中梯度解吸，是指吸附完毕后，先用20-50%的溶剂洗饱和树脂，然后用70-90%的溶剂进行解吸，流速为0.5-1倍柱体积/小时。

8.根据权利要求1所述的方法，其中步骤6）解吸浓缩液用乙酸乙酯萃取，去离子水洗涤，乙酸乙酯萃取液在20℃-50℃条件下真空浓缩,得到阿扎霉素B粗提物 。

9.根据权利要求1所述的方法，其中步骤7）的结晶，要求每千克阿扎霉素B粗提物中加入3-10升的乙酸乙酯、异丙醇或乙醇，结晶液过滤后真空干燥，得到白色的阿扎霉素B精粉。