[发明专利]杨梅叶原花色素低聚体的超声波制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及功能食品领域，特别涉及食品植物化学组分领域。

背景技术

原花色素是一类黄烷-3-醇类单体及其C4-C8或C4-C6键连接而成聚合体的多羟基酚类化合物，分子骨架为C6-C3-C6，是植物生长过程中的次生代谢产物，因在酸性介质中加热能产生花色素而得名，原花色素具有良好的抗氧化(Kim Y.J.，Yokozawa T.Modulation of oxidative stress and melanogenesis by proanthocyanidins.Biological & Pharmaceutical Bulletin.2009，32(7)，1155-1159.)、抗癌(Lu J.M.，Zhang K.Q.，Chen S.A.，Wen W.Grape seed extract inhibits VEGF expression via reducing HIF-1alpha protein expression.Carcinogenesis.2009，30(4)，636-644.)、预防和治疗心血管疾病(Karthikeyan K.，Bai B.R.S.，Devaraj S.N.Cardioprotective effect of grape seed proanthocyanidins on isoproterenol-induced myocardial injury in rats.International Journal of Cardiology.2007，115，(3)，326-333.)和抗糖尿病及其并发症(Lee Y.A.，Kim Y.J.，Cho E.J.，Yokozawa T.Ameliorative Effects of Proanthocyanidin on Oxidative Stress and Infl ammation in Streptozotocin-Induced Diabetic Rats.Journal of Agricultural and Food Chemistry 2007，55，9395-9400.)等生物活性，已广泛的应用于食品、化妆品和医药等领域。

原花色素的生物活性跟其聚合度密切相关，聚合度大于5视为多聚原花色素。因其分子量较大和位阻效应影响了酚羟基的活性，导致其生物活性降低，而天然植物中的原花色素多以多聚体形式存在，因此，原花色素的降解研究受到广泛关注。目前，研究较多的原花色素的降解方法有催化氢、解亚硫酸降解的化学方法(杜晓，唐伟，廖学品.落叶松多聚原花色素的Pd/C催化氢解反应研究.化学研究与应用，2005，17(4)：456；田亚新，王运来，韩晓云，刘继伟，康传红.亚硫酸法降解沙棘籽原花色素的条件优化，东北林业大学学报，2012，40(1)：108-113)和微生物降解的方法(王恒永，真菌降解沙棘原花色素的初步研究，黑龙江大学[硕士论文]，哈尔滨：2010，5.7)。

经研究发现杨梅叶原花色素含量非常高(约110mg/g DW)，结构鉴定发现主要为原飞燕草素；没有发现用超声波来制备杨梅叶原花色素低聚体的研究和报导。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种杨梅叶原花色素低聚体的制备方法，采用本发明的方法能获得大含量的聚合度≤4的杨梅叶原花色素低聚体。

为了解决上述技术问题，本发明提供一种杨梅叶原花色素低聚体的制备方法，包括以下步骤：

1)、在容器中加入纯度(即质量含量)≥50％的杨梅叶原花色素提取物和作为溶剂的乙醇，得混合料液；将所述混合料液于-5～50℃的温度、20khz超声频率下超声处理30～80分钟；

纯度≥50％的杨梅叶原花色素提取物与乙醇的用量比为：10g纯度≥50％的杨梅叶原花色素提取物/20～40ml乙醇；

2)、将步骤1)所得产物经过滤，所得的滤液进行色谱分离，得杨梅叶原花色素低聚体。

作为本发明的杨梅叶原花色素低聚体的制备方法的改进，步骤1)中的超声处理为：

装有混合料液的容器被置于低温恒温槽中，选用探头式脉冲超声波仪器，探头插入混合料液的液下1～1.5cm，混合料液的深度(即液面高度)保持4～8cm，脉冲时间为1～4s，占空比为30％～90％，低温恒温槽中控制温度为-5～50℃，声强为60.55～544.59W/cm²，处理时间为30～80分钟。

作为本发明的杨梅叶原花色素低聚体的制备方法的进一步改进，步骤2)中的色谱分离为：