[发明专利]一种污染土壤遗传毒性的原位检测方法

说明书

技术领域

本发明属于污染土壤遗传毒性检测技术领域，特别涉及一种污染土壤遗传毒性的原位检测方法。

背景技术

遗传毒性指化学物对生物体遗传物质损伤造成的毒性，并可能由此引起肿瘤、突变或畸形(参考文献：1、印木泉.遗传毒理学.北京：科学出版社，2002.)。与普通的化学毒性相比，遗传毒性作用缓慢，因此其危害可能在短时间内被忽视而引起更严重的问题，而遗传毒性检测的难度也相应更大。

当待测样品以土壤为介质时，通常有原位和异位两种检测方法。原位检测指直接检测土壤介质中的污染物的毒性；异位检测指将土壤介质中的污染物提取至液相，通过间接检测液相中的毒性以表征土壤样品毒性(参考文献：2、Plaza G，Nalecz-Jawecki G，Ulfig K，et al.Assessment of genotoxic activity of petroleum hydrocarbon-bioremediated soil.Ecotoxicology and Environmental Safety，2005，62(3)：415-420.)。

在科学研究和工程应用中较常见的土壤遗传毒性原位检测方法，包括蚯蚓的彗星试验(参考文献：3、Xiao R Y，Wang Z J，Wang C X，et al.Genotoxic risk identification of soil contamination at a major industrialized city in northeast China by a combination of in vitro and in vivo bioassays.Environmental Science &Technology，2006，40(19)：6170-6175.；4、Zhu J，Zhao Z Y，Lu Y T.Evaluation of genotoxicity of combined soil pollution by cadmium and phenanthrene on earthworm.Journal of Environmental Sciences-China，2006，18(6)：1210-1215.)、植物种子发芽试验(参考文献：5、李彬，李培军，王晶，等.污染土壤毒性研究方法进展.环境污染治理技术与设备，2003，4(5)：42-46.；6、Baek K H，Kim H S，Oh H M，et al.Effects of crude oil，oil components，and bioremediation on plant growth.Journal of Environmental Science and Health Part a-Toxic/Hazardous Substances &Environmental Engineering，2004，39(9)：2465-2472.)、土壤微型动物繁殖情况(参考文献：7、Patterson C J，Semple K T，Paton G I.Non-exhaustive extraction techniques(NEETs)for the prediction of naphthalene mineralisation in soil.Fems Microbiology Letters，2004，241(2)：215-220.)等，但上述方法存在试验周期长、操作复杂、灵敏度低、成本较高等缺陷，不适用于大量样品快速灵敏的检测。

常见的土壤异位检测方法，包括动物的生理生态监测、动物细胞彗星试验、AMES细菌回复突变试验、生物传感细胞检测等。然而土壤样品异位毒性检测方法具有以下严重不足：在毒性检测过程中引入了污染物萃取和固液分离的环节，增加了测试的不确定性以及测试的所需的时间和经济成本；经过萃取的样品不能代表污染物在土壤中的真实赋存状态，从而导致高估或低估样品的毒性；忽视了污染物在土壤介质中的生物有效性等对遗传毒性的重要影响(参考文献：8、Frische T.Ecotoxicological evaluation of in situ bioremediation of soils contaminated by the explosive 2，4，6-trinitrotoluene(TNT).Environmental Pollution，2003，121(1)：103-113.)。