[发明专利]一种转基因水稻外源插入载体旁侧序列及其应用无效
| 申请号： | 201210084127.7 | 申请日： | 2012-03-27 |
| 公开（公告）号： | CN102628040A | 公开（公告）日： | 2012-08-08 |
| 发明（设计）人： | 杨正友;李文华;赵凤春;田园 | 申请（专利权）人： | 山东农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/11 | 分类号： | C12N15/11;C12N15/10;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 271018 山东省*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 转基因 水稻 插入 载体 旁侧 序列 及其 应用 | ||
1.一种转基因水稻品系SK-2的外源插入载体的旁侧序列，所述旁侧序列为3'端旁侧序列，其特征在于：3'端旁侧序列如SEQ ID NO:1所示。
2.一种转基因水稻品系SK-2的外源插入载体的旁侧序列，所述旁侧序列为5'端旁侧序列，其特征在于：5'端旁侧序列如SEQ ID NO:2所示。
3.权利要求1所述的旁侧序列的制备方法，其特征在于提取转基因水稻品系SK-2植物基因组DNA，通过TAIL-PCR扩增得到。
4.权利要求2所述的旁侧序列的制备方法，其特征在于提取转基因水稻品系SK-2植物基因组DNA，通过PCR扩增得到。
5.如权利要求1所述的转基因水稻品系SK-2外源插入载体的旁侧序列的应用，其特征是利用该序列特征设计的转基因水稻SK-2的品系特异性定性PCR检测方法：
合成引物如下：Sk2-F1：5'-CCACCACTTCAAGAACTCTGTAGC-3'和Sk2-R1 5'-GTAGGGGTAGGTAAT TGGGAAGG-3'；
提取总DNA，利用SK2-F1/SK2-R1组合进行PCR扩增；PCR产物以琼脂糖凝胶电泳分离，EB染色后鉴定是否存在扩增产物，如存在产物则说明样品中含有转基因水稻品系SK-2来源的成分。
6.按权利要求2所述的转基因水稻品系SK-2外源插入载体的旁侧序列的应用，其特征是利用该序列特征设计的转基因水稻SK-2的品系特异性定性PCR检测方法：
合成引物如下：Sk2-F2：5'- ATATAGGGTCCACATGTTAGG-3'和Sk2-R2: 5'- ATGACGTATCAAAGTACCGAC-3'；提取总DNA，利用SK2-F2/SK2-R2组合进行PCR扩增；PCR产物以琼脂糖凝胶电泳分离，EB染色后鉴定是否存在扩增产物，如存在产物则说明样品中含有转基因水稻品系SK-2来源的成分。
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