[发明专利]一种pH敏感型聚电解质微囊给药载体的制备方法

说明书

(一)技术领域

本发明涉及一种pH敏感型给药载体的制备方法，尤其涉及一种预先填充白蛋白的聚电解质微囊给药载体的制备方法。

(二)背景技术

随着医药领域的不断发展，为了提高药物的生物利用度、降低药物的毒副作用以及取得药物疗效的最大化，同时具备长循环、靶向和环境敏感等多重性质的多功能药物载体已成为近些年药剂学领域的研究热点之一。环境敏感作为一个重要的组成部分，药物被包封在此类载体中能够保护药物在血液循环中不被降解，而在特定的部位进行释放。

层层自组装(Layer-by-layer，LBL)是将两种具有相反电荷的聚电解质囊材交替吸附在母核上，达到理想层数后选择适宜的溶剂去除母核，得到中空的聚电解质微囊的一种方法。基于层层自组装技术的聚电解质微囊在药物传递、催化、传感等多个领域已引起广泛的关注。作为药物传递载体，该微囊除了能够在纳米尺度上对微囊的大小、组成、结构、形态和囊壁厚度进行精确的控制，且制备条件温和外，其显著的优越性还在于它的多功能性以及对环境的敏感性。pH、温度、离子强度、光等均可调节其囊壁的渗透性从而控制药物的释放。但是作为药物载体，它的载药量比较低，这极大影响了它作为药物载体的发展前景。自沉积作用是指药物分子通过与预先填充在聚电解质微囊里面的聚合物的静电吸引作用而被高浓度地富集于微囊内部，从而极大地提高载药量，在聚电解质微囊的载药方面展示了独特的优势。但是如何按照需要控制这种自沉积作用以及如何释放这些被静电紧紧吸引的药物是一项挑战与意义并存的工作。

白蛋白被认为是一种生物相容性很好的天然的脂溶性药物的载体，已经广泛应用于药物传递系统，如紫杉醇白蛋白纳米粒。牛血清白蛋白(BSA)是一种来源丰富且价格低廉的白蛋白，它的分子量约为66kD，加热至70℃左右会发生凝胶化。BSA的等电点为4.8，当pH值大于4.8时BSA带负电，而小于4.8时BSA带正电。这一特性为其应用于pH敏感型载体提供了依据。将BSA预先填充在聚电解质微囊中，再通过调整pH值改变BSA的电荷，不仅可以将药物高浓度地富集到微囊内部，而且还可以对药物的释放进行控制。

(三)发明内容

本发明目的是针对聚电解质微囊研究现状的不足，提供一种pH敏感型聚电解质微囊给药载体的制备方法。

本发明采用的技术方案是：

一种pH敏感型聚电解质微囊给药载体的制备方法，所述方法为：(1)将白蛋白加入0.025mol/L～0.33mol/L氯化钙水溶液中使白蛋白的浓度为0.5mg/mL～5mg/mL，搅拌溶解，在搅拌下迅速加入与所述的氯化钙水溶液相同摩尔浓度等体积的碳酸钠水溶液，继续搅拌均匀，静置，取沉淀，干燥，获得白蛋白碳酸钙微粒；(2)取步骤(1)获得的白蛋白碳酸钙微粒按如下步骤操作①分散在0.5mg/mL～2mg/mL(优选1～2mg/mL)聚电解质A溶液中，室温(20℃)搅拌孵育10～20min，离心分离，取沉淀洗涤，所述白蛋白碳酸钙微粒的质量用量以聚电解质A溶液的体积计为100～200mg/mL(即每1mL聚电解质A溶液中分散100～200mg的白蛋白碳酸钙微粒，优选100mg/mL)；②再将洗涤后的沉淀分散在0.5mg/mL～2mg/mL(优选1～2mg/mL)与聚电解质A溶液等体积的聚电解质B溶液中，室温(20℃)搅拌孵育10～20min，离心分离，取沉淀洗涤，取洗涤后的沉淀即得到完成1次双层包衣的白蛋白碳酸钙微粒，③将1次包衣后的白蛋白碳酸钙微粒反复操作①与②步骤3～5次，完成多次双层包衣，离心，洗涤，获得核壳结构的胶体微粒；所述聚电解质A和聚电解质B为两种具有相反电荷的聚电解质；(3)将步骤(2)获得的核壳结构的胶体微粒用0.2mol/L的EDTA溶液溶解去核，离心，取沉淀分散于去离子水中，70～80℃加热使白蛋白分子充分凝胶化，离心，沉淀即为所述pH敏感型聚电解质微囊给药载体。

步骤(1)所述白蛋白为牛血清白蛋白或人血清白蛋白，优牛血清白蛋白选。

步骤(1)所述白蛋白在0.025mol/L～0.33mol/L氯化钙水溶液中的浓度为2.0mg/mL～3.0mg/mL。

步骤(1)取沉淀方法为：反应结束后，将反应液4000～7000r/min离心5～10min，取沉淀，真空干燥48～72h，获得白蛋白碳酸钙微粒。

本发明所述聚电解质A和B可以是各种具有相反电荷的聚电解质，分别优选为聚烯丙基胺盐酸盐、聚苯乙烯磺酸钠；壳聚糖、海藻酸钠。

步骤(2)所述聚电解质A为聚烯丙基胺盐酸盐，所述聚电解质B为聚苯乙烯磺酸钠。