[发明专利]抗肿瘤化合物及其制备方法与应用

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种抗肿瘤化合物及其制备方法与应用。

背景技术

据世界卫生组织统计，癌症是一个世界性的主要的死亡原因，全世界范围内因癌症而死亡的人数呈逐年递增的态势，2008年癌症死亡人数达760万(约占所有死亡人数的13％)，预计到2030年，全球癌症死亡人数将增加45％。因此对于癌症的治疗来讲面临着非常严峻的挑战。发现并研究具有高效、低毒的抗肿瘤药物至关重要。

发明内容

本发明的一个目的是提供一种化合物。

本发明所提供的化合物，其结构式如式I所示：

式I。

本发明的另一个目的是提供上述化合物的制备方法。

本发明所提供的所述化合物的制备方法，包括如下步骤：

在液体培养基中发酵链霉菌(Streptomyces sp.)LS1924 CGMCC No.5240，得到发酵液；分离所述发酵液，即得到权利要求1所述的化合物。

所述液体培养基由以下成分组成：

葡萄糖、稷粉、棉籽蛋白粉、3-(N-吗啉基)丙磺酸和水；

以上成分在所述液体培养基中的浓度分别为：

1升培养基中含5-15g葡萄糖、10-30g稷粉、10-30g棉籽蛋白粉和10-30g 3-(N-吗啉基)丙磺酸，调pH 7.0-7.5，在本发明的实施例中具体为1升培养基中含10g葡萄糖、20g稷粉、20g棉籽蛋白粉和20g 3-(N-吗啉基)丙磺酸，调pH 7.0。

所述分离所述发酵液的方法包括如下步骤：

1)先将所述发酵液离心，分别收集上清液和沉淀；

2)先将步骤1)得到的上清液经大孔吸附树脂进行吸附层析，收集层析洗脱液，将步骤1)得到的沉淀用甲醇浸泡，收集甲醇提取液；再合并所述洗脱液和所述甲醇提取液，得到合并产物，即得到上述的化合物。

上述方法中，步骤1)中，所述离心为4℃8000转/min(离心腔直径45cm)离心15min；

步骤2)中，所述经大孔吸附树脂进行吸附层析为将所述上清液流过大孔吸附树脂进行吸附，再用洗脱缓冲液进行洗脱；

所述大孔吸附树脂的型号为HP-20或X-5；

所述吸附层析的洗脱缓冲液为乙醇；

所述甲醇浸泡的时间为10小时，浸泡在室温(25℃)下进行。

在上述分离后，还包括将所述合并产物依次进行如下纯化的步骤：

A、将上述得到的合并产物进行硅胶柱层析分离，得到一次纯化产物；

B、将步骤A得到的一次纯化产物进行凝胶色谱分离，得到二次纯化产物；

C、将步骤B得到的二次纯化产物进行HPLC分离，得到式I所示化合物。

步骤A)中，所述硅胶柱层析分离为将所述合并产物流过硅胶柱以进行吸附，再用洗脱缓冲液进行洗脱，收集体积比为80∶20石油醚和丙酮混合液洗脱得到的洗脱液，即得到一次纯化产物；

所述洗脱缓冲液为体积比为90∶10-50∶50的石油醚和丙酮混合液，所述洗脱为梯度洗脱；所述体积比为90∶10-50∶50的石油醚和丙酮混合液具体为体积比为90∶10石油醚和丙酮混合液、体积比为80∶20石油醚和丙酮混合液、体积比为70∶30石油醚和丙酮混合液、体积比为60∶40石油醚和丙酮混合液、体积比为50∶50石油醚和丙酮混合液；

步骤B)中，所述凝胶色谱分离为将所述一次纯化产物流入凝胶柱，再用洗脱缓冲液进行洗脱，收集洗脱液，再经TLC分析，显色的洗脱液即为二次纯化产物；

所述凝胶柱为Sephadex LH-20，所述洗脱缓冲液为体积比为1∶1的氯仿和甲醇混合液；

TLC分析的展层溶剂为体积比为3∶1的石油醚和丙酮混合液，TLC分析在254nm紫外光下监测。

步骤C)中，所述HPLC为将所述二次纯化产物流过色谱柱以进行吸附，再用洗脱缓冲液进行洗脱，收集21.4min洗脱液，得到式I所示化合物；

所述HPLC的条件为Agilent ZORBAX-XDB反相色谱柱，RP-C18，5μm，9.4*250mm，检测波长254nm。

所述洗脱缓冲液为体积百分含量为65％的甲醇水溶液。

本发明的又一个目的是提供一种用于抗肿瘤的药物。

本发明所提供的用于抗肿瘤的药物，其活性成分为上述化合物。

上述化合物在制备抗肿瘤的药物中的应用也属于本发明的保护范围。