[发明专利]一种利用寡核苷酸拆分手性药物的方法

说明书

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体的是涉及一种利用寡核苷酸拆分手性药物的方法。

背景技术

随着现代分析测试技术的发展，人们发现越来越多的医药化合物具有手性结构特征，即具有相互呈镜像但彼此不能重合的对映异构体；手性药物的对映异构体通常表现出不同的生理行为，具有不同甚至截然相反的药效[J.Chromat.A，2001，906，3-33]。因此，研究开发具有光学纯度的手性药物已成为医药技术领域研究的重点和难点之一。制备具有光学纯度的手性药物需要依托不对称合成和手性拆分技术，而关键在于设计和研制具有高立体选择性的手性拆分剂。目前，优先结晶法、手性膜拆分法、色谱拆分法、酶拆分法等手性拆分技术已经广泛应用于手性药物对映体的研究和制备中[Anal.Chem.2010，82，4712-4722]。然而现有的这些方法都难以实现单一对映体的高效制备，通常得到的都是不同对映体的混合物。因此，如何调控手性拆分剂以实现对手性药物不同对映异构体的高效分子识别成为当今科学家们亟待研究的一个课题[Nature Materials，2003，2，272-278]。

DNA作为生物体内储存遗传信息的重要物质，因其独特的手性结构特征和分子识别特性，已成为材料和信息科学领域研究的热点[Chirality，2007，19：658-682；Science，2008，321，1795-1799]，特别是利用DNA分子组装体为模板引导蛋白质、量子点、过渡金属等构筑单元的准确定位，以形成多尺度结构特征的、功能化超分子组装体[Nature Nanotechnol.，2006，1，190-194]。另一方面，从化学和生物学的角度，利用分子纳米技术可以调控和设计具有特定组成和特定功能的DNA序列[Nature Reviews Genetics，2006，7，565-576；Angew.Chem.Int.Ed.，2007，46，6226-6236]，使其在手性药物的选择性合成与特异性识别方面显露出诱人的应用前景。

基于DNA二级结构的多样性和可调控性，以及碱基之间相互作用力弱等特点，利用小分子物质，特别是某些金属离子，可以诱导DNA构型发生改变。这种诱导作用与金属离子的类型和浓度、DNA序列的组成和长度以及溶液离子强度都有关系[Nucleic Acids Research，2000，28，2439-2445]。例如，特定碱基组成的核酸序列在Ni²⁺或精氨的诱导下，其双螺旋结构可以由B型向Z型转变，这种手性结构以及表现出来的光谱特征的改变，为小分子药物特异性识别提供了依据[J.Phys.Chem.B，2011，115，10182-10188；J.Am.Chem.Soc.，2009，131，2046-2047]。另外，金属离子的加入，可以改变DNA序列与小分子药物之间的结合作用，增大或减少DNA对药物的结合能力[J.Fluoresc，2011，21，113-118]。到目前为止，利用特定的双链寡核苷酸序列，通过金属离子的诱导调控作用，对手性药物对映体进行拆分还未曾报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种利用寡核苷酸拆分手性药物的方法。

本发明的技术方案概述如下：

一种利用寡核苷酸拆分手性药物的方法，包括如下步骤：

(1)在pH为5-9条件下，向50-4000体积份数的摩尔浓度为0.025-1mmol/L的双链寡核苷酸溶液中加入1体积份数的摩尔浓度为0.01-1mol/L的二价金属离子无机盐的水溶液，在10-40℃下混合均匀，得到双链寡核苷酸-金属离子复合物溶液；

(2)在与步骤(1)相同的pH条件下，将1-100体积份数的所述双链寡核苷酸-金属离子复合物溶液与1体积份数的摩尔浓度为0.15-2mmol/L的手性药物溶液混合，吸附15-60分钟；用截留分子量为1000-10000的超滤膜进行超滤，滤液为富集的手性药物的一种对映异构体溶液，双链寡核苷酸-金属离子复合物上的吸附物为富集的手性药物的另一种对映异构体。

步骤(1)优选为：在pH为5-9条件下，向100-1000体积份数的摩尔浓度为0.05-0.5mmol/L的双链寡核苷酸溶液中加入1体积份数的摩尔浓度为0.05-0.5mol/L的二价金属离子无机盐的水溶液，在20-30℃下混合均匀，得到双链寡核苷酸-金属离子复合物溶液。